TRPV1通道异源表达体系的建立和功能的初步研究
本文关键词:TRPV1通道异源表达体系的建立和功能的初步研究
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【摘要】:目的构建能够表达TRPV1通道用于实验研究的HEK 293T细胞表达体系。方法采用脂质体转染方式将TRPV1质粒转入人胚胎肾HEK 293T细胞,建立TRPV1型通道瞬时异源表达体系,并对转染后的TRPV1表达体系进行了鉴定,同时对该通道功能特性进行了研究。结果经荧光显微镜观察,转染率可达40%~50%;Western Blot研究发现转染后的HEK 293T细胞在与TRPV1通道蛋白相应的位置上具有明显的条带,提示TRPV1通道蛋白在转染后的细胞中有异源性表达;共聚焦显微成像显示,转染后的HEK293T细胞在受到TRPV1通道激动剂刺激后,胞内荧光强度明显变强,提示TRPV1通道介导钙离子功能正常。结论研究结果表明,基于HEK 293T细胞的TRPV1通道瞬时转染的异源表达体系成功构建。
【作者单位】: 哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心;中国中医科学院中药研究所;
【基金】:国家自然科学基金面上项目(No 81274112,81373986,81473372);国家自然科学基金青年项目(No 81403125,81403322) 北京市自然科学基金(No 7152106)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: TRPV1通道又被称为辣椒素受体,是瞬变感受器电位离子通道蛋白(transient receptor potential ion channel pro-tein,TRP)家族中的第一个被发现和克隆的成员,由432个氨基酸组成,也是目前研究得最多的TRP家族成员之一[1-2]。TRPV1通道组织分布广泛,表达于背根神经节和三叉神经节
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本文编号:1156853
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