硫化氢通过CaMKKβ-AMPK信号通路延缓大鼠主动脉内皮细胞老化

发布时间：2017-11-10 02:31

  本文关键词：硫化氢通过CaMKKβ-AMPK信号通路延缓大鼠主动脉内皮细胞老化

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【摘要】：该研究探讨了硫化氢(H2S)延缓大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cells,RAECs)老化的机制。原代RAECs传代培养至第4代为年轻组,传代至第12代为老年组。从第4代起,给予H2S的供体Na HS培养至第12代为Na HS组;从第4代起培养至第12代,在提取处理细胞前6 h加入Ca MKKβ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase kinaseβ)特异性抑制剂STO-609共培养,即STO-609组;从第4代起,给予H2S的供体Na HS培养至第12代,在提取处理细胞前6 h加入STO-609共培养,即Na HS+STO-609组。采用SA-β-gal(senescence-associatedβ-galactosidase)染色法和DAPI荧光染色法检测细胞的老化程度和老化相关异染色质(senescence-associated heterochromatin foci,SAHF)的表达变化。通过化学比色法检测RAECs的NO(nitric oxide)含量。应用Western blot方法检测细胞Ca MKKβ、AMPK(AMP-activated protein kinase)和p-AMPK蛋白的表达。结果显示,与年轻组相比,老年组细胞老化程度明显增加,细胞中SA-β-gal阳性率和SAHF形成率显著增加(P0.01),NO含量明显下降(P0.01)。与老年组相比,Na HS处理组的SA-β-gal阳性率和SAHF形成率明显下降,同时NO含量上升(P0.01)。与年轻组相比,老年组Ca MKKβ、AMPK和p-AMPK蛋白质水平明显降低(P0.01),而给予Na HS处理后,Ca MKKβ、AMPK和p-AMPK增加(P0.05)。给予STO-609阻断Ca MKKβ信号通路,能够降低或消除Na HS的细胞保护作用(P0.01)。结果表明,外源性H2S通过影响Ca MKKβ-AMPK信号通路减轻RAECs的衰老过程,延缓了细胞老化的进程。
【作者单位】： 徐州医科大学生理学系;徐州医科大学病理学系;
【基金】：江苏省自然科学基金(批准号:BK20131119) 国家自然科学基金(批准号:81200250) 江苏省研究生创新计划项目(批准号:KYLX14-1444)资助的课题~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 江苏省自然科学基金(批准号:BK20131119)、国家自然科学基金(批准号:81200250)和江苏省研究生创新计划项目(批准号:KYLX14-1444)资助的课题网络出版时间:2016-05-26 16:14:31 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20160526.1614.006.html衰老引起的血管结构和功能

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本文编号：1164702