sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用
本文关键词:sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用
【摘要】:目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。
【作者单位】: 郑州大学生命科学学院干细胞研究室;郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心;郑州大学第一附属医院干细胞研究室;
【基金】:国家自然科学基金资助项目U1404313,81471306 河南省高校科技创新团队基金资助项目15IRTSTHN022 河南省科技创新人才计划基金资助项目154200510008
【分类号】:R329
【正文快照】: 人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,h UC-MSCs)具有自我更新和多向分化潜能,为脊髓损伤、脑损伤等神经系统疾病的治疗带来希望[1-2]。但是体外培养的h UC-MSCs同正常细胞一样,也会呈现衰老变化,从而限制干细胞的使用[3]。研究发现sirt2参与调控
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,本文编号:1166269
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