重组大肠杆菌SAHN和LuxS蛋白表达及群感效应分析
本文关键词:重组大肠杆菌SAHN和LuxS蛋白表达及群感效应分析
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【摘要】:为研究大肠杆菌细胞内S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,SAHN)与S-核糖基高半胱氨酸酶(S-ribosylhomocysteinase,Lux S)的活性对菌体群感效应的影响,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增sahn与lux S目的基因,构建p ET-28a-SAHN与p ET-28a-Lux S重组表达载体,转化大肠杆菌BL21,以IPTG诱导表达;以哈氏弧菌BB170为报告菌株,通过测定诱导前后的荧光强度检测信号分子AI-2相对量;通过96孔板生物膜实验,对构建菌株在诱导前后的生物膜生成量进行测定。结果表明:SAHN与Lux S酶蛋白在诱导后的大肠杆菌AI-2的表达量分别为诱导前的3.93、3.89倍,生物膜致密度分别为诱导前的1.8、1.6倍;大肠杆菌经诱导后,表达过量的SAHN酶蛋白对菌体的生长分裂及群感效应的影响更大。
【作者单位】: 济南大学生物科学与技术学院;华侨大学生物医学学院;
【分类号】:Q812;;Q932
【正文快照】: 在感染病领域,耐药细菌的感染是全球关注的重要问题之一。目前采用的相应策略主要有:合理使用抗生素以降低致细菌耐药变异速度;探讨新的抑菌途径,研发新型抗菌药物对抗耐药菌。通过甲基化修饰改变抗菌药物靶点的结构是以大肠杆菌(E.coli)为代表的致病菌的一种重要的耐药机制[1
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,本文编号:1176709
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