无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立

发布时间：2017-11-13 03:20

  本文关键词：无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒工艺的建立

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【摘要】：目的建立无血清培养基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株的工艺。方法分别采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培养Vero细胞制备狂犬病病毒CTN-1V株,比较无血清培养基培养不同代次Vero细胞间及无血清与含血清培养基培养Vero细胞间制备的狂犬病病毒滴度及效力。将2 g/L微载体cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero细胞,37℃培养3 d,按MOI=0.02接种狂犬病病毒CTN-1V株,检测病毒收获液的病毒滴度及效力,每天显微镜下观察细胞生长情况,计算细胞比生长速率。结果无血清培养基培养不同代次Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度和效力差异无统计学意义(P0.05);无血清和含血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒的滴度差异无统计学意义(P0.05),但无血清培养基培养Vero细胞制备狂犬病病毒效力明显高于含血清的培养基(P0.05)。搅拌瓶微载体系统培养Vero细胞制备狂犬病病毒,细胞贴壁均匀,生长良好,收获病毒液的平均病毒滴度为6.50 lg FFU/ml,平均病毒效力为6.77 IU/ml。结论初步建立了微载体系统无血清培养Vero细胞制备狂犬病病毒的工艺,为无血清规模化制备狂犬病疫苗奠定了基础。
【作者单位】： 兰州生物制品研究所有限责任公司;
【基金】：甘肃省战略性新兴产业创新支撑专项课题[甘财建(2014)111号]
【分类号】：R392
【正文快照】： Vero细胞为全球认可的生产人用及动物用疫苗的细胞基质,基于其对多种病毒敏感的特性,建立Vero细胞的规模化培养技术在病毒性疫苗、重组蛋白、单克隆抗体等生产技术平台中具有重要的价值。传统的动物细胞培养常添加牛血清、胰酶等组分,其在促进细胞生长、消化传代等方面的作用

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