检测犬弓形虫SAG3抗体间接ELISA方法的建立

发布时间：2017-11-14 14:28

  本文关键词：检测犬弓形虫SAG3抗体间接ELISA方法的建立

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【摘要】：目的以弓形虫重组SAG3蛋白为抗原,建立一种检测犬弓形虫抗体的间接ELISA方法。方法采用棋盘滴定法确定抗原的包被浓度和阳性血清稀释度,再对该方法的封闭剂以及封闭时间、犬弓形虫阳性血清孵育时间、二抗稀释度以及加入显色液孵育时间等各项条件进行优化;通过对弓形虫感染犬血清及犬心丝虫、等孢球虫、蛔虫及巴贝斯虫感染血清的检测评价方法的敏感性和特异性。结果该方法最佳优化条件分别为:抗原包被浓度0.82μg/孔,封闭剂为含10%胎牛血清的PBST,被检血清稀释度1∶20;兔抗犬酶标二抗稀释度1∶8 000。优化的ELISA敏感性为1∶1 280,犬心丝虫、等孢球虫、蛔虫及巴贝斯虫感染血清均未发生交叉阳性反应;批间、批内重复性试验的变异系数均15%。结论建立的ELISA方法特异性较强,敏感性高,批内、批间重复性较好,可用于犬弓形虫感染的检测。
【作者单位】： 天津农学院动物科学与动物医学学院;吉林大学动物医学学院;
【基金】：国家公益性行业(农业)科研专项(No.201303042) 吉林省科技发展计划项目(No.20130206023NY)
【分类号】：S858.292;R382.5
【正文快照】： ***弓形虫寄生于人和许多种动物的有核细胞,引起人畜共患弓形虫病(toxoplasmosis)。孕妇或孕畜感染弓形虫可引起早产、流产甚至死胎,免疫功能受损、缺陷患者感染及垂直感染常可导致严重的并发症甚至死亡,健康人感染后成为无症状的带虫宿主。部分感染者有淋巴结肿大的症状[1-2]

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