内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭能力影响的机制研究

发布时间：2017-11-15 01:16

  本文关键词：内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭能力影响的机制研究

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【摘要】：目的探讨RGD修饰的人内皮抑素30肽对HepG2细胞黏附、侵袭的影响及作用机制。方法人工合成人内皮抑素1~30位氨基酸(30肽,序列25~31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,同法合成人内皮抑素1~27位氨基酸构成的27肽作为对照。细胞黏附实验及Transwell实验分别检测30肽和27肽对HepG2细胞黏附能力和侵袭能力的影响,同时筛选与侵袭作用相关的整合素;免疫荧光检测30肽和27肽对αvβ3整合素的聚集作用,流式细胞仪检测30肽和27肽对HepG2细胞表面相应整合素表达的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测30肽和27肽对HepG2细胞TIMP1和TIMP2 mRNA和蛋白质表达量的影响。结果 30肽能明显抑制HepG2细胞黏附、侵袭,对侵袭作用的影响与整合素αvβ3相关,同时,30肽能上调Hep G2细胞中TIMP1和TIMP2 mRNA及蛋白质的表达,30肽加αvβ3抗体后,上述作用明显增强。结论 30肽可能是通过整合素αvβ3发挥其抗肿瘤侵袭转移作用,可以成为临床上肝癌的辅助化疗药物发挥作用。
【作者单位】： 齐齐哈尔医学院生物化学教研室;
【基金】：黑龙江省教育厅资助项目(No:12511619) 齐齐哈尔医学院博士专项科研基金项目
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 内皮抑素是O'Reilly等[1]发现的一种内源性血管生成抑制剂,由胶原蛋白ΧⅧ羧基端的184个氨基酸残基组成,研究发现其具有抑制肿瘤生长、改善肺纤维化等作用,且与其他多种疾病相关[2-3],因此,内皮抑素日益受到研究者的关注和重视。已有研究证实,内皮抑素活性区主要在N端的1~27个

【共引文献】

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本文编号：1187777