人LOX-1基因毕赤酵母表达载体的构建与表达研究

发布时间：2017-11-22 14:08

  本文关键词：人LOX-1基因毕赤酵母表达载体的构建与表达研究

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【摘要】：目的构建血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)真核表达载体,筛选高表达菌株,为体外获得有活性重组蛋白奠定基础。方法以实验室保存的含有人源LOX-1基因的质粒为模板PCR扩增LOX-1基因,经过TA克隆后亚克隆至酵母表达载体p PICZαA,将获得的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33,利用原位双膜法快速检测阳性高表达菌株,最后经过甲醇诱导,采用Western blot检测LOX-1的表达。结果成功构建LOX-1真核表达载体,双膜法筛选到高表达菌株;Western blot结果显示,LOX-1在上清中得到表达。结论 LOX-1基因在毕赤酵母细胞上清中得到表达,为体外获得活性重组蛋白和研究其致动脉粥样硬化功能奠定基础。
【作者单位】： 大连大学生命科学与技术学院糖脂代谢重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81202536) 辽宁省大学生创新训练项目(201511258040)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-likeoxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)属于E类清道夫家族成员,是C型植物凝集素样Ⅱ型跨膜蛋白,由273个氨基酸组成[1]。在结构上由1个短的N端细胞质区,单链跨膜区,细胞外区域和1个C端血凝素样配基连接区4个部分组成[，

本文编号：1214943