家蝇细胞色素P450还原酶的原核表达与活性鉴定

发布时间：2017-11-23 10:10

  本文关键词：家蝇细胞色素P450还原酶的原核表达与活性鉴定

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【摘要】：目的家蝇是重要的卫生害虫,其抗药性问题突出,其中细胞色素P450介导的代谢解毒作用增强是其抗药性的重要机制。细胞色素P450还原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)是细胞色素P450酶系的重要组分,建立家蝇细胞色素P450还原酶(Md CPR)表达体系有助于通过重组家蝇细胞色素P450酶系以鉴定家蝇抗药性的生物化学机制。方法将家蝇CPR基因的编码区克隆到表达载体(p B508)上构建重组质粒,在大肠埃希菌中重组质粒经异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达的Md CPR蛋白进行细胞定位分析和活性测定。结果 Md CPR蛋白在大肠埃希菌中成功地得到表达,分子质量为76×103左右,表现出细胞色素C还原酶活性,主要定位在细胞的膜成分中。结论在大肠埃希菌中表达了具有还原酶活性的Md CPR蛋白,为进一步研究家蝇细胞色素P450的功能及其在抗药性中的作用奠定了基础。
【作者单位】： 内蒙古大学生命科学学院;中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室;中国科学院大学;
【基金】：北京市自然科学基金(5142014)~~
【分类号】：R384.2
【正文快照】： 家蝇(Musca domestica)作为一种常见的疾病媒素。P450s是一类含有血红蛋白的氧化酶类,在生介,不仅危害人类健康,同时危害畜牧业的发展[1]。物体内可催化许多初级和次级代谢反应,如蜕皮激随着化学农药的广泛使用,家蝇普遍产生了抗药性[2],素的合成和杀虫剂及植物次级代谢产物等

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本文编号：1218090