人抗P53蛋白单克隆抗体的制备及评价
本文关键词:人抗P53蛋白单克隆抗体的制备及评价
【摘要】:目的制备获得人P53蛋白单克隆抗体,并应用于免疫组化检测。方法利用基因重组方法,将p53基因构建到原核质粒载体上并诱导表达,将收集获得的P53蛋白免疫小鼠,经细胞融合及亚克隆手段获得鼠源单克隆抗体,与商品化的抗体DO-1共同染色蜡块包埋的病理组织样本,比较二者的染色结果。结果在筛选获得的与DO-1检测结果相近的5株抗体内,取检测结果最接近的1株抗体5E10,经Protein A/G株纯化抗体,与收集获得的数例癌症组织蜡块进行免疫组化验证,发现结果均与DO-1的结果无明显差异。结论成功制备并筛选出1株人抗P53单克隆抗体,可用于免疫组化染色。
【作者单位】: 河南中医学院郑州市抗体组学重点实验室;河南省肿瘤病理诊断试剂工程技术研究中心;
【基金】:河南中医学院省属科研业务费专项(2014KYY-WF-ZZCX3-06)
【分类号】:R392
【正文快照】: P53蛋白是由393个氨基酸组成的一类磷酸化蛋白,相对分子质量为53 000,故称为P53蛋白。p53被称为基因卫士,是迄今发现与人类恶性肿瘤相关性最高的基因,也是肿瘤细胞中基因变异频率最高的靶基因,50%的肿瘤患者中均发现p53基因有缺失或突变[1]。P53蛋白的表达水平受p53基因的影响
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,本文编号:1239678
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