补阳还五汤联合MSCs移植对脑缺血再灌注模型大鼠VEGF及信号通路的影响

发布时间：2017-12-02 02:21

  本文关键词：补阳还五汤联合MSCs移植对脑缺血再灌注模型大鼠VEGF及信号通路的影响

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【摘要】：目的揭示补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)移植促进脑缺血血管新生的机制。方法选取雄性SD大鼠96只,随机分为脑缺血再灌注模型组、内皮细胞抑制素组、MSCs移植组及补阳还五汤联合MSCs移植组。参照改良的Longa法建立大鼠脑缺血再灌注模型(MCAO)。模型组在立体定位仪下,用微量进样器通过侧脑室给予生理盐水10μl;抑制素组给予内皮细胞抑制素阿瓦斯汀5μl,生理盐水5μl;MSCs组及联合组给予阿瓦斯汀5μl、培养的MSCs 5μl。联合组术前3天给予补阳还五汤(10ml/kg)灌胃,其它各组以同等体积的生理盐水灌胃,每日一次。模型组、抑制素组及MSCs组48 h后,采集实验动物血清和脑组织;联合组分别于12h、24h、36h、48h采集,采用免疫组化法检测大鼠血清VEGF及缺血脑组织VEGF的表达;应用免疫印迹蛋白法检测VEGFR2、p-VEGFR2、ERK、p-ERK、AKT、p-AKT的蛋白含量。结果抑制素组与模型组相比,大鼠血清及脑组织VEGF含量明显降低(P0.05);ERK、AKT含量变化不大(P0.05);VEGFR2、p VEGFR2、p ERK和p AKT表达均显著下降(P0.05)。MSCs组与抑制素组相比,大鼠血清及脑组织VEGF含量明显升高(P0.05);ERK、AKT含量影响不大(P0.05);VEGFR2、p-VEGFR2、p-ERK和p-AKT表达均升高(P0.05);联合组与抑制剂组相比,除ERK外,所有指标均有升高,以24h、36h、48h三个时间点最为明显(P0.05、P0.01)。结论内皮细胞抑制素(阿瓦斯汀)可通过抑制VEGFR2及其磷酸化,降低ERK、AKT的磷酸化水平,阻止经MAPK途径的胞Qg信号转导途径,从而抑制内皮细胞的增殖和迁移,阻止新生血管的形成;MSCs组及联合组主要经VEGFR-2所介导的信号通路及PI3K/AKT信号途径,诱导内皮细胞增殖和迁移,促进血管新生,对ERK途径的胞Qg信号影响不大。
【作者单位】： 河南中医学院;河南中医学院第一附属医院;
【基金】：国家自然科学基金(No.81072799/H2708)
【分类号】：R285.5;R-332
【正文快照】： P13K/Akt;ERK前期的研究证明:补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞通过促进神经细胞分化、抑制神经细胞凋亡、促进神经营养因子等机制对大鼠脑缺血再灌注损伤起到保护作用[1~5]。血管新生[6](An-giogenesis)是指从已存在的血管上以出芽方式长出新的毛细血管的过程,是一个程序化的

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