抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定

发布时间：2017-12-06 06:06

  本文关键词：抗A型流感病毒聚合酶碱性蛋白1多克隆抗体的制备和鉴定

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【摘要】：流感病毒属于正黏病毒科,为有包膜包裹的单股负链RNA病毒。它的8个基因片段编码至少16种病毒蛋白,其中3个蛋白组成流感病毒的聚合酶复合体。流感病毒聚合酶碱性蛋白1(PB1)是该复合体的组分之一,在病毒的转录、复制及重配中发挥重要的作用。为研究其功能,构建His-PB1(aa 550 755)融合蛋白原核表达质粒,IPTG诱导融合蛋白表达,通过镍柱亲和将其纯化,然后作为抗原免疫家兔。对抗血清进行间接ELISA检测,表明抗体效价可达1∶100 000。兔源PB1蛋白抗血清经亲和纯化后,用于免疫印迹检测流感病毒WSN毒株PB1蛋白以及外源转染的FLAG-PB1蛋白,结果表明该PB1抗体具有良好的特异性,同时也能特异性识别其他亚型的A型流感病毒的PB1蛋白,为进一步研究流感病毒PB1蛋白的功能奠定了基础。
【作者单位】： 中国科学院微生物研究所;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)(No.2011CB504705) 国家科技重大专项(No.2013ZX10004611)资助~~
【分类号】：R392
【正文快照】： 流感病毒属于正黏病毒科,为有包膜包裹的单股负链RNA病毒[1]。流感病毒8个基因片段编码16种蛋白[2-3]。每个基因片段都被核蛋白(NP)以及RNA依赖的RNA聚合酶包裹,形成病毒核糖核蛋白复合体[4]。其中,RNA依赖的RNA聚合酶复合体由聚合酶碱性蛋白1(PB1)、聚合酶碱性蛋白2(PB2)、聚

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