miR-338-5p通过靶向核因子κB1调控B细胞生物学功能

发布时间：2017-12-11 04:28

  本文关键词：miR-338-5p通过靶向核因子κB1调控B细胞生物学功能

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【摘要】：目的验证miR-338-5p对核因子κB1(NF-κB1)水平的影响,研究其对B细胞生物学功能的调控作用。方法利用双荧光素酶报告基因检测系统进行miR-338-5p靶基因的验证;采用抗Ig M抗体和/或重组人B细胞活化因子(rh BAFF)蛋白刺激的B细胞培养体系,将miR-338-5p激动剂、miR-338-5p拮抗剂、NF-κB1小干扰RNA(si NF-κB1)及其对应的阴性对照制剂转染CD20+B淋巴细胞,利用实时定量PCR法检测各转染组NF-κB1 mRNA水平,Western blot法检测NF-κB1蛋白(p105、p50)的水平,ELISA检测培养上清中Ig G含量。结果靶基因验证实验显示,miR-338-5p模拟物与报告载体共转染组的hRluc/h Luc萤光素酶活力比值显著升高;体外培养实验结果显示,在抗Ig M抗体与rh BAFF蛋白共培养体系,miR-338-5p激动剂转染组NF-κB1 mRNA、p105蛋白、p50蛋白、Ig G水平均显著升高,si NF-κB1的作用与miR-338-5p激动剂相反;miR-338-5p拮抗剂转染组NF-κB1 mRNA、Ig G水平均显著降低;相关性分析结果表明,NF-κB1 mRNA水平与Ig G水平呈显著正相关。结论 miR-338-5p靶向正调控NF-κB1、间接作用于BAFF信号参与调控B细胞生物学功能。
【作者单位】： 苏州大学附属第三医院泌尿外科实验室;苏州大学医学生物技术研究所;
【基金】：国家自然科学基金(81273267) 江苏省自然科学基金(BK2011248) 常州市卫生局重大项目(ZD201111)
【分类号】：R392
【正文快照】： B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)是肿瘤坏死因子超家族成员,与BAFF特异性受体(BAFF receptor,BAFF-R)、穿膜蛋白活化物和CAML相互作用蛋白(transmembrane activator andCAML interactor,TACI)、B细胞成熟抗原(B cellmaturation antigen,BCMA)的结合,在调节B细胞

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本文编号：1277187