酸沉淀法纯化14血清型肺炎链球菌荚膜多糖工艺的建立

发布时间：2017-12-12 01:27

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【摘要】：目的建立一种14血清型肺炎链球菌荚膜多糖的酸沉淀法纯化工艺,以替代传统的苯酚抽提法。方法对建立的14型肺炎链球菌荚膜多糖酸沉淀法中的氯化钙终浓度(0、50、100、200、400 mmol/L)、p H值(3.5、4.0、4.5、5.0及5.7)及反应时间(0、1、2、4、6、8 h及过夜)进行优化。采用优化后的方法纯化3批14型肺炎粗制多糖,制备精制多糖,并进行理化指标、抗原性检测及核磁分析,同时与苯酚抽提纯化工艺进行比较。结果酸沉淀法的最佳工艺为:氯化钙终浓度50~100 mmol/L,p H值3.5~4.0,作用时间为过夜。采用该方法制备的3批14型肺炎精制多糖的蛋白和核酸杂质含量均较低,总磷、总氮、氨基己糖含量、多糖分子质量均符合企业注册标准,抗原活性和核磁共振图谱的分析结果表明其多糖结构无异常。结论酸沉淀法具有操作简便、效果显著及不需使用有毒有害试剂等优点,可用于纯化14型肺炎链球菌荚膜多糖。
【作者单位】： 成都生物制品研究所有限责任公司;
【分类号】：R378.14
【正文快照】： 肺炎链球菌为革兰阳性菌,是引发肺炎、脑膜炎、中耳炎、心内膜炎等侵入性疾病的首要致病菌。肺炎荚膜多糖是肺炎链球菌的主要致病因子之一,具有良好的免疫原性和安全性[1-2]。目前,已发现约90个血清型的肺炎链球菌,其中23个血清型涵盖了约90%的致病原。14型肺炎链球菌是其中最

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6 牛司强;罗淼;尹一兵;汪德强;;新肺炎链球菌毒力因子GHIA的鉴定及其结构功能研究[A];中国晶体学会第五届全国会员代表大会暨学术大会（大分子分会场）论文摘要集[C];2012年

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8 柏晓辉;周丛照;陈宇星;;在肺炎链球菌中大量表达糖基化蛋白PsrP[A];中国晶体学会第五届全国会员代表大会暨学术大会（大分子分会场）论文摘要集[C];2012年

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10 杨晓亮;崔亚利;王虹;刘鑫;庞丹;班艳娜;尹一兵;张雪梅;;肺炎链球菌假想蛋白SPD-0873溶菌酶活性的分析和鉴定[A];重庆市生物化学与分子生物学学术会议论文摘要汇编[C];2009年

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2 葛秋芳;英科学家发现肺炎链球菌产生抗药性的机理[N];中国中医药报;2008年

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