条件性血管瘤转基因小鼠模型的建立

发布时间：2017-12-13 08:09

  本文关键词：条件性血管瘤转基因小鼠模型的建立

  更多相关文章： 多瘤病毒中间T基因 血管瘤 条件性转基因 动物模型

【摘要】：目的:采用条件性转基因策略构建小鼠血管瘤动物模型,并对其表型进行鉴定。方法:构建血管内皮细胞特异性表达启动子Tie2驱动的鼠多瘤病毒中间T基因(PyMT)表达质粒(pTie2-PyMT),采用DNA显微注射方法,将血管内皮特异性表达的PyMT目的基因导入供体C57BL/6J小鼠的雄原核中,再移植到假孕鼠的输卵管中,产生转基因首建鼠。PCR方法检测目的基因整合情况,检查转基因鼠基因型,观察转基因鼠表型,对于转基因鼠出现的新生物进行组织学及免疫组织化学检测。采用Graph Pad Prism 5.0软件包对实验数据进行统计学分析。结果:经测序分析证实,pTie2-PyMT质粒中PyMT、Tie2启动子和Tie2增强子序列等组成元件被正确克隆、连接,且阅读框正确。出生小鼠基因型经PCR鉴定证实,阳性的转基因小鼠均出现血管瘤样新生物表型。血管瘤样新生物主要表达部位在小鼠的耳、舌、皮肤、黏膜、肝等部位,组织学检查证实为血管瘤样病变,免疫组织化学方法证实新生物的内皮细胞表达Py MT蛋白及血管内皮标志物CD31。结论:Tie2启动子驱动下的PyMT基因可以在小鼠体内诱发血管瘤,该模型鼠可用于血管瘤发病机制的研究。条件控制下的转基因技术是一种有效的建立血管瘤动物模型的方法。
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面-头颈肿瘤科上海市口腔医学重点实验室·上海市口腔医学研究所;上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(81070845) 上海市科委项目(12140901100)
【分类号】：R-332;R732.2
【正文快照】： 血管瘤是一种常见的婴幼儿良性肿瘤,好发于颌面部,以具有快速增长期和缓慢消退期为临床特征。尽管部分婴幼儿血管瘤具有自行消退的特点,但是仍然有部分血管瘤不能自行消退,同时伴有出血、溃疡形成等并发症,重者可造成颌面部组织缺损和功能障碍,对患儿的身心健康产生严重影响[1

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本文编号：1284403