沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体的构建及表达

发布时间：2017-12-16 22:17

  本文关键词：沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体的构建及表达

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【摘要】：目的构建沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813真核表达载体并观察其在Hela细胞中的表达,为研究其与宿主间的相互作用奠定基础。方法克隆CT813基因,分别对CT813与pcDNA3.1/Myc-HisA空质粒进行双酶切,T4连接酶进行连接,然后进行菌落PCR、酶切及测序鉴定;将构建的重组质粒pcDNA3.1/Myc-HisA-CT813转染Hela细胞后采用Western blot与间接免疫荧光法检测目的蛋白表达。结果 PCR显示,扩增的目的基因片段约795bp,与预期相符;经NotⅠ与kpnⅠ双酶切鉴定重组质粒构建正确,测定其序列与NCBI数据库完全一致;Western blot显示重组质粒转化Hela表达的CT813融合蛋白分子质量单位为29.4kd左右;间接免疫荧光法检测该蛋白位于细胞胞浆中,是衣原体分泌性蛋白。结论成功构建了PcDNA3.1/Myc-His A-CT813真核表达载体并表达了沙眼衣原体包涵体膜蛋白CT813,对研究其生物学功能及与宿主配体间的相互作用具有重要意义。
【作者单位】： 河北北方学院病原生物学与免疫研究所临床检验诊断学重点实验室;
【基金】：河北省自然科学基金项目(No.C2014405041)
【分类号】：R374.1
【正文快照】： *?**?沙眼衣原体感染是全球的主要公共健康问题之一,其感染通常较为隐匿,且病程迁延,因而造成病原体的广泛传播。如沙眼衣原体可感染人的生殖系统,由于感染者大多无明显的症状[1],因此难以早期发现,但这种隐形感染随后可引起一系列生殖道并发症和后遗症[2],严重者可引起女性输

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本文编号：1297679