质谱法分析旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的组分

发布时间：2017-12-22 22:25

  本文关键词：质谱法分析旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白的组分　出处：《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2016年01期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的分析旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)的组分,寻找其抗肿瘤活性组分。方法收集纯净的旋毛虫脱囊肌幼虫,制备旋毛虫肌幼虫ESP。采用15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离ESP,将分离获得的所有蛋白条带进行胰蛋白酶酶解,采用液质联用质谱法(LC-MS/MS)进行鉴定。利用Gene Ontology(GO)对已鉴定蛋白质进行细胞组分、分子功能和生物过程的富集分析。结果经SDS-PAGE电泳分离获得清晰的蛋白质条带,相对分子质量(Mr)为10 000~142 000。质谱分析共鉴定出162种蛋白质,其中63种为已明确鉴定的蛋白质,34种为假定蛋白质,65种为未鉴定的蛋白质。鉴定出6种与抗肿瘤相关的蛋白质,即原肌球蛋白、组蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特异因子亚基2、Kazal 4型丝氨酸蛋白酶抑制剂、犰狳极性蛋白和真核起始因子4A。GO富集分析显示,已鉴定的蛋白质具有54种不同的分子功能,参与细胞构成并参与382种生物过程。结论旋毛虫肌幼虫ESP组分复杂,有多种未鉴定的蛋白质,从已知的63种蛋白质中筛选出6种与抗肿瘤相关的蛋白质。
【作者单位】： 承德医学院病原生物学教研室;承德医学院免疫学教研室;承德石油高等专科学校机械工程系;
【基金】：河北省教育厅资助重点项目(No.ZD2014049)~~
【分类号】：R383.15
【正文快照】： 按照来源部位的不同,旋毛虫(Trichinella500 U/ml青链霉素的RPMI 1640培养液中,37℃、spiralis)蛋白可分为表面蛋白、虫体可溶性蛋白和5%CO2、饱和湿度条件下培养24 h。选取虫体活排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)[1]。跃、死虫率5%的培养皿,将培养液于4℃、12

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本文编号：1321307