血红蛋白催化过氧化氢氧化酪氨酸反应对血红蛋白的保护作用

发布时间：2017-12-27 12:13

本文关键词：血红蛋白催化过氧化氢氧化酪氨酸反应对血红蛋白的保护作用　出处：《西北大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：血红蛋白氧载体应用于缺血再灌注,由于缺血再灌注产生活性氧簇(ROS)及活性氮簇(RNS)本身对机体造成损伤,而Hb更易被活性氧簇(ROS)及活性氮簇(RNS)氧化反应,形成失去携氧功能的Fe3+Hb,同时诱导活性氧自由基的产生,在过氧化氢(H2O2)和超氧亚硝酸根离子(ONOO-)等氧化物质的作用下Hb不断氧化从而使Fe3+Hb和Fe4+Hb形成循环从使缺血再灌注持续损伤,大量氧自由基和Fe4+Hb积累,而Fe4+Hb是一种强氧化剂,导致脂质过氧化,形成脂质自由基,蛋白质修饰及DNA断裂等一系列级联反应,从而加重了缺血再灌注损伤,因此这个问题需要得以解决。本文发现亚铁血红蛋白蛋白具有特殊的过氧化物酶活性,能催化过氧化氢氧化酪氨酸的反应,本文对血红蛋白的酶特性的相关验证,其研究的目的是血红蛋白具有酶催化活性,在HBOC中加入酪氨酸来解决H202氧化血红蛋白,清除H202,保护血红蛋白氧载体,从而减轻缺血再灌注损伤。实验结果：以酪氨酸为氢供体底物,通过荧光法检测Hb或者PolyHb在Tyr+H2O2反应体系的反应产物荧光,发现在0.02mol/L pH7.4的PB缓冲液中,Hb或PolyHb对该反应产物的荧光强度有增强的作用,而血红蛋白结合CO发现反应产物的荧光没有增强,说明血红蛋白的酶催化活性在铁卟啉环上,从而证明了血红蛋白具有酶的催化作用；在此基础上通过紫外法检测在酪氨酸存在下,Hb或PolyHb的光谱吸收峰的变化及Fe4+Hb的生成。结果发现酪氨酸存在下,Hb或PolyHb的两个特征吸收峰没有发生变化及620nm处Fe4+Hb明显受到抑制作用。由以上的实验结果得出的结论是Hb或者HBOC具有过氧化物模拟酶的催化作用,主要是血红蛋白中血红素/Fe2+起催化作用,同时在血红蛋白中加入酪氨酸后,有效的抑制血红蛋白的氧化,因此酪氨酸对血红蛋白氧载体在缺血再灌注损伤方面具有潜在的应用,有待于进一步研究其具体的保护机制。
[Abstract]:Hemoglobin based oxygen carrier used in ischemia reperfusion, ischemia reperfusion due to ROS production cluster (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) damage to the body itself, while Hb more susceptible to reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) oxidation reaction, the formation of loss of oxygen function of Fe3+ Hb. At the same time induced by active oxygen free radicals and hydrogen peroxide (H2O2) and superoxide in the nitrite ion (ONOO-) oxidation substance Hb to oxidation so that Fe3+Hb and Fe4+Hb formed from the cycle of ischemia reperfusion injury sustained, large amount of oxygen free radicals and Fe4+Hb accumulation, while Fe4+Hb is a strong oxidant. That leads to lipid peroxidation, lipid free radical formation, a series of cascade reactions of protein modification and DNA fracture, which will aggravate the ischemia reperfusion injury, so this problem needs to be solved.
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

【参考文献】