人巨细胞病毒Han株US12基因缺失株的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的复制

发布时间：2017-12-30 03:09

  本文关键词：人巨细胞病毒Han株US12基因缺失株的构建及其在人胚肺成纤维细胞中的复制　出处：《中国医科大学学报》2017年06期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的构建人巨细胞病毒(HCMV)Han株US12基因缺失的BAC毒株,研究US12产物对HCMV Han株在人胚肺成纤维细胞(HELF)中复制的影响。方法以侧翼含有US12基因同源序列的PCR引物扩增卡那霉素抗性基因,电转至含有Han株BAC质粒的大肠杆菌DY380-Han-wt-BAC,PCR及DNA测序验证US12缺失的病毒序列。将缺失突变质粒Han-ΔUS12-BAC-P电转至HELF,获得感染性病毒颗粒Han-ΔUS12-BAC。以MOI为0.1的Han-ΔUS12-BAC毒株及Han-wt-BAC毒株感染HELF,TCID50法测定上清中病毒滴度,绘制病毒增殖曲线。结果成功构建了Han-ΔUS12-BAC克隆,转染HELF后成功获得感染性病毒。生长曲线实验结果表明,ΔUS12缺失和野生型毒株在HELF中复制增殖与扩散水平无明显差异。结论 US12为HCMV临床株Han在HELF中增殖和扩散过程中的非必需基因。
[Abstract]:......
【作者单位】： 中国医科大学附属盛京医院病毒研究室;锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室;沈阳市妇婴医院临床实验室;沈阳市妇婴医院儿科;
【基金】：国家自然科学基金(30672248,81371788) 盛京医院自由研究者项目
【分类号】：R373
【正文快照】： 人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV) US12家族包括US12~US21共10个位置相邻但彼此没有重叠序列的开放读码框架,编码产物与G蛋白耦联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)超家族及抗凋亡蛋白Bax inhibitor 1家族具有结构同源性[1]。该家族成员基因高度保守[2-3],推

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本文编号：1353054