HCV刺激鼠小胶质细胞后TLR7和细胞因子的表达研究

发布时间：2018-01-01 19:34

  本文关键词：HCV刺激鼠小胶质细胞后TLR7和细胞因子的表达研究　出处：《宁夏医科大学》2011年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：目的研究HCV阳性血清刺激小鼠小胶质细胞BV2(BV2细胞)后,BV2细胞内TLR7的表达变化,及其信号通路介导的细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-α的表达变化,探讨TLR7在抗HCV免疫应答中的作用机制和对中枢神经系统可能的免疫发病机制。 方法用含20%HCV的阳性血清刺激BV2细胞,在刺激后不同时间点收集细胞及培养上清液,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、间接免疫荧光标记的流式细胞术(FCM)及酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测TLR7 mRNA、TLR7蛋白及IL-6、TNF-α和IFN-α的表达水平,同时设空白对照组和正常人血清组。多组均数间的比较采用方差分析。 结果在BV2细胞中有TLR7 mRNA和TLR7蛋白的表达;HCV刺激BV2细胞后,可诱导TLR7 mRNA和TLR7蛋白表达水平升高,12h、24 h、48 h HCV阳性血清组较空白组及正常人血清组比较差异有统计学意义(P0.05);我们还观察到TLR7 mRNA和TLR7蛋白随时间延长呈递增趋势,HCV阳性血清组培养上清液中IL-6、TNF-α的表达也呈递增趋势,IL-6在刺激后48 h与正常人血清组及空白对照组比较差异有统计学意义(P0.05),TNF-α在刺激后24 h、48 h时与正常人血清组及空白对照组比较差异均有统计学意义(P0.05),IFN-α在在刺激24 h后表达低水平增高(P0.05),但持续时间较短。 结论HCV阳性血清刺激BV2细胞后,细胞胞体增大,表面的突起变短、增粗;TLR7表达显著升高,TLR7激活后能够启动BV2细胞的固有免疫反应;IL-6和TNF-α变化趋势与TLR7一致,IFN-α在HCV阳性血清刺激后24小时短时间增高;表明TLR7可能在HCV导致的CNS的发病中发挥重要作用。
[Abstract]:Objective To study the expression of TLR7 in BV2 cells and the expression of IL - 6 , TNF - 伪 and IFN - 伪 in BV2 cells following the stimulation of BV2 ( BV2 cells ) in mice with HCV positive serum . The mechanism of TLR7 in anti - HCV immune response and possible mechanisms for immune pathogenesis of central nervous system were discussed . Methods The expression levels of TLR7 mRNA , TLR7 protein and IL - 6 , TNF - 伪 and IFN - 伪 were detected by real - time fluorescence quantitative PCR ( RT - qPCR ) , indirect immunofluorescence labeled flow cytometry ( FCM ) and enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . The levels of TLR7 mRNA , TLR7 protein and IL - 6 , TNF - 伪 and IFN - 伪 were detected by means of real - time fluorescence quantitative PCR ( RT - qPCR ) , indirect immunofluorescence labeled flow cytometry ( FCM ) and enzyme - linked immunosorbent assay ( ELISA ) . Results The expression of TLR7 mRNA and TLR7 in BV2 cells was significantly higher than that in normal controls ( P0.05 ) . Conclusion After stimulation of BV2 cells with HCV positive serum , the cell volume is increased , the protrusion of the surface becomes shorter , the thickening is increased , and the expression of TLR7 is significantly increased . After TLR7 is activated , the innate immune response of BV2 cells can be activated ; the change trend of IL - 6 and TNF - 伪 is consistent with TLR7 , and IFN - 伪 is increased within 24 hours after HCV positive serum stimulation ; it is suggested that TLR7 may play an important role in the pathogenesis of the CNS caused by HCV .

【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329

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本文编号：1365911