平面双分子层脂质膜上人工重建大电导钙激活钾通道

发布时间：2018-01-02 22:02

本文关键词：平面双分子层脂质膜上人工重建大电导钙激活钾通道　出处：《生理学报》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：本研究旨在探索建立一种稳定平面双分子层脂质膜(planar lipid bilayer membranes,PLBMs)的制备方法,并尝试将大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channel,BK_(Ca))蛋白融合其上进行单通道电流研究。将卵磷脂与胆固醇氯仿按3:1比例混合,用N_2吹干氯仿,制成癸烷脂质液,采用涂抹法制备PLBMs,并将BK_(Ca)重建到PLBMs上,用膜片钳研究其单通道特性。结果显示,重建到PLBMs上的BK_(Ca)的单通道的电导值为(206.8±16.9)pS,当浴液中[Ca~(2+)]=0μmol/L时,无论超极化或去极化状态下均很少见到BK_(Ca)的通道活动。膜电位为+40 m V时,当[Ca~(2+)]由1μmol/L增加到100μmol/L时,通道开放概率由0.034±0.002增加到0.961±0.013,平均开放时间由(1.1±0.2)ms延长到(151.3±10.2)ms,平均关闭时间由(32.2±2.8)ms缩短为(2.1±1.8)ms;当K+浓度为40/140 mmol/L(Cis/Trans)时,重建的BK_(Ca)反转电位在-30 mV左右。以上结果提示:(1)涂抹法可用于PLBMs的制备;(2)重建后的BK_(Ca)通道具有电导值大、电压依赖性、Ca~(2+)敏感性和K~+选择性;(3)PLBMs技术可用于BK_(Ca)通道的药理学和动力学特性的研究。
[Abstract]:The results showed that the conductivity of BK _ ( Ca ) was increased from 0 . 34 卤 0 . 002 to 0 . 961 卤 0 . 013 . When K + concentration was 40 / 140 mmol / L ( cis / Trans ) , the open probability of channel was increased from 0 . 34 卤 0 . 002 to 0 . 961 卤 0 . 013 .

【作者单位】：西南医科大学心血管医学研究所心血管疾病预防和治疗协同创新中心医学电生理学教育部重点实验室;
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173661) Joint Grant of Luzhou Municipality and Luzhou Medical College,Sichuan Province,China(No.2013LZLY-J05)
【分类号】：R3411
【正文快照】： This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173661)and Joint Grant of Luzhou Munici-pality and Luzhou Medical College,Sichuan Province,China(No.2013LZLY-J05).在天然细胞上,有关大电导钙激活钾通道(largeconductance calciu

【相似文献】