铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中凋亡诱导因子的表达

发布时间：2018-01-03 01:03

  本文关键词：铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中凋亡诱导因子的表达　出处：《辽宁医学院》2011年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 铜绿假单胞菌 细胞凋亡 线粒体 AIF DNA

【摘要】：目的 探讨凋亡诱导因子在铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)上清液诱导J774细胞凋亡中的表达。 方法 1、将J774与浓度为15%PA上清液在37℃的水浴箱中分别培养3h、6h和9h。 2、以Giemsa、Hoechst33258荧光等染色及Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测为指标,观察细胞形态学变化,研究PA上清液对J774细胞凋亡的诱导作用。 3、用Western印迹分析检测AIF蛋白在PA上清液诱导J774细胞凋亡中的表达水平。 4、用琼脂凝胶(1.8%)电泳法测到特征性的150-1500bp的DNA降解片段。 结果 Giemsa染色和Hoechst33258荧光染色显微镜下观察:随时间延长,凋亡细胞数量逐渐增多,3h组细胞膜完整的,但出现发泡现象;6、9h组细胞皱缩,核密度增高,核断裂,可见凋亡小体,对照组细胞则正常生长。Annexin V FITC/PI双染流式细胞仪检测,表明PA上清液可诱导J774细胞迅速发生凋亡,且凋亡率随时间延长明显升高,组间比较均有统计学差异(P均0.01)。各实验组间比较差异均有统计学意义(P0.01)。Western blot结果显示,3h组AIF开始出现低量表达,6、9h组AIF表达更加明显,与对照组比较均有统计学差异(P均0.01)。用琼脂凝胶(1.8%)电泳法测到特征性的150-1500bp的DNA降解片段。 结论 1、PA上清液可以诱导J774细胞凋亡。 2、PA上清液PA所致的J774细胞的凋亡具有时间依赖性。 3、PA上清液诱导J774细胞凋亡与AIF表达有关。
[Abstract]:Purpose To investigate the expression of apoptosis-inducing factor in the supernatant of Pseudomonas aeruginosa PA) induced apoptosis in J774 cells. Method 1. The supernatants of J774 and 15kPA were cultured in a water bath at 37 鈩，

本文编号：1371687