HIV-1非人灵长类易感动物模型前期研究

发布时间：2018-01-03 05:23

本文关键词：HIV-1非人灵长类易感动物模型前期研究　出处：《中国农业科学院》2011年硕士论文　论文类型：学位论文

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【摘要】：艾滋病研究尚缺乏合适的动物模型。非人灵长类动物模型被认为是研究艾滋病毒(HIV-1)感染的理想动物模型,但天然抗逆转录病毒的限制因子的存在限制了HIV-1的跨种间感染。近年研究表明TRIM5α和APOBEC3G(A3G)是主要的限制因子。猴TRIM5α结合HIV-1的衣壳蛋白(CA)而限制其复制,而一些旧大陆猴中发现了TRIM5α的一种CypA基因插入剪接突变体TRIMCyp,其失去了对HIV-1的限制。A3G主要包裹在病毒颗粒中,对第二轮的感染具有限制作用,且这种限制作用具有种属特异性,即人A3G不能限制HIV-1的复制,却对猴艾滋病毒(SIV)具有限制作用。反之,猴的A3G不能限制SIV,却能限制HIV-1。这种种属的特异性只由数个氨基酸位点决定,若突破这两种限制,则HIV-1有可能感染猴。本研究首先对SIV的SIVmac239与猴/人艾滋病毒的SHIV89.6P这两株病毒进行拯救、鉴定、并定量,作为后续动物感染实验的参考毒株。此外,本文首次应用毛发PCR法对中国品系猕猴TRIMCyp进行了筛选,并在食蟹猴中筛选出了TRIMCyp纯合子个体,建立了可靠的毛发检测方法,仅需一到两根毛发即可满足对基因组DNA的提取,减少了采血检测对猴体的伤害。在此基础上,首次对中国TRIMCyp纯合子个体食蟹猴A3G基因进行克隆表达,并在该基因决定种属特异性关键性限制位点进行突变,进行了限制性实验研究。同时,对人APOBEC3G基因也进行了克隆表达,并根据猕猴序列,在相应位点进行了点突变,作为参照。研究结果表明食蟹猴A3G基因的以上突变失去了对HIV-1复制的限制。本文研究为建立HIV-1易感食蟹猴模型提供了重要参考。
[Abstract]:A3G is considered to be an ideal animal model for HIV - 1 infection , but the presence of natural antiretroviral therapy limits the cross - species infection of HIV - 1 . In recent years , it has been shown that TRIM5伪 and APOBEC3G ( A3G ) are the main limiting factors . In recent years , it has been found that TRIM5伪 and APOBEC3G ( A3G ) are the main limiting factors . In some old Chinese monkeys , A3G does not restrict the replication of HIV - 1 . In contrast , A3G does not limit HIV - 1 . In contrast , A3G does not limit HIV - 1 . The specificity of this species is only determined by several amino acid sites . In this paper , we first apply the hair PCR method to screen the genome DNA of Chinese strains of Macaca mulatta , and establish a reliable method for the detection of human APOBEC3G gene . The results show that the above mutation of A3G gene of Chinese trimeCyp has lost the restriction on replication of HIV - 1 .

【学位授予单位】：中国农业科学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R-332

【共引文献】