半乳糖凝集素-3联合HGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞
发布时间:2018-01-03 19:30
本文关键词:半乳糖凝集素-3联合HGF诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞 出处:《重庆医学》2016年15期 论文类型:期刊论文
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【摘要】:目的探索半乳糖凝集素-3(Gal-3)联合肝细胞生长因子(HGF)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向肝样细胞分化的可行性及最佳诱导条件,并对诱导后的细胞进行鉴定。方法离心、贴壁培养分离大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定表面标志。取第3代细胞进行分组诱导培养,A组:0μg/mL Gal-3+20ng/mL肝细胞生长因子(HGF);B组:0.1μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;C组:0.5μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;D组:1.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;E组:2.0μg/mL Gal-3+20ng/mL HGF;阳性对照组:SD大鼠肝脏细胞IAR20。分别于诱导后7、14、21、28d时段进行细胞形态学观察、免疫荧光染色检测、实时荧光定量核酸扩增检测(Q-PCR)鉴定其诱导分化情况。结果分组诱导培养后,各组BMSCs形态逐渐向肝样细胞转化,与大鼠原代肝脏细胞IAR20相似,其中28d时间段,C组转化成IAR20相似细胞比例最高;各组甲胎蛋白(AFP)、清蛋白(ALB)荧光染色阳性率明显增高,并且在28d时间点C组AFP、ALB的荧光染色阳性率最高;C组AFP、ALB mRNA表达明显增加,同时以28d时间点表达量达到峰值。结论 Gal-3联合HGF能有效诱导大鼠BMSCs分化为肝样细胞,分化后的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB,且其诱导效率与诱导培养时间和Gal-3浓度有关。
[Abstract]:Objective To investigate the feasibility and optimal induction conditions of rat bone marrow mesenchymal stem cells ( BMSC ) induced by galactosyl - 3 ( Gal - 3 ) combined with hepatocyte growth factor ( HGF ) in rat bone marrow mesenchymal stem cells ( MSCs ) . The results were as follows : 鈶,
本文编号:1375288
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