一种易操作的小鼠肝细胞的分离及培养方法

发布时间：2018-01-04 00:11

  本文关键词：一种易操作的小鼠肝细胞的分离及培养方法　出处：《中国比较医学杂志》2017年11期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的在传统肝细胞提取方法的基础上,优化一种易操作、快速实用获取小鼠肝细胞的方法,为从事肝脏功能相关研究人员提供改良的实验方法参考。方法以肝脏分离液逆向灌注小鼠肝脏后,剪碎,肝脏酶消化后密度梯度离心分离肝细胞,转入培养基培养。采用台盼蓝染色计算细胞活力,流式细胞检测技术计算纯度,倒置显微镜观察细胞形态。结果获得较高纯度和活力的肝细胞,具备肝细胞的典型形态特征。结论通过逆向灌注,降低了灌注的难度,同时获得较高纯度、较高活力的肝细胞,经多次实验证明该方法确实是一种易操作、高效适用的肝细胞提取方法。
[Abstract]:Objective based on the traditional method of hepatocyte extraction, to optimize a rapid and practical method for obtaining mouse hepatocytes. Methods Hepatic cells were isolated from mouse liver by reverse perfusion with liver isolate, then shredded, digested by liver enzyme and centrifuged by density gradient centrifugation. The cell viability was calculated by trypan blue staining, the purity was calculated by flow cytometry, and the morphology was observed by inverted microscope. Conclusion by reverse perfusion, the difficulty of perfusion is reduced, and the liver cells with high purity and activity are obtained. The method is proved to be easy to operate by many experiments. An efficient and applicable method for hepatocyte extraction.
【作者单位】： 第三军医大学第一附属医院中心实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81372089)
【分类号】：R-33
【正文快照】： 肝脏是人体最大的实质器官和重要的排毒器官。在人体中担负着去氧化、存储肝糖、合成分泌性蛋白质等重要作用。同时也是消化系统中重要的消化腺。它可以制造胆汁来帮助食物的消化,也是尿素合成的主要脏器,更是新陈代谢的重要器官[1]。因此,肝脏对于人体的重要作用不言而喻。肝

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本文编号：1376194