肠道菌群失衡前后小鼠派氏结内T淋巴细胞亚群分析及功能变化的研究

发布时间：2018-01-12 20:25

  本文关键词：肠道菌群失衡前后小鼠派氏结内T淋巴细胞亚群分析及功能变化的研究　出处：《大连医科大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

  更多相关文章： 菌群失衡 派氏结 T淋巴细胞 免疫偏移

【摘要】：目的： 通过分析小鼠肠道菌群失衡前后派氏结（Peyer’s patches,PP）内T淋巴细胞及亚群数量以及细胞因子表达的变化，阐明菌群失衡对小鼠派氏结内T淋巴细胞结构和功能的影响。 方法： 1.沿用抗生素头孢曲松钠灌胃的方法建立小鼠肠道菌群失衡模型。以头孢曲松钠终浓度为8g/kg/d剂量，连续灌胃8天，建立小鼠重度菌群失衡模型；以头孢曲松钠终浓度为4g/kg/d剂量，连续灌胃4天，建立小鼠轻度菌群失衡模型。 2.利用EDTA振荡法去上皮和胶原酶Ⅳ消化法制备正常组、轻度菌群失衡组、重度菌群失衡组小鼠肠派氏结总单细胞悬液。以本管未添加抗体细胞作为阴性对照，调整细胞浓度为106个/管，三联荧光抗体标记流式细胞术检测T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+和调节性T细胞CD4+CD25+的变化，并计算CD4/CD8比值。 3.利用RT-PCR法检测正常组、轻度菌群失衡组和重度菌群失衡组派氏结内Th1类淋巴细胞分泌的IL-2、IFN-γ和Th2类淋巴细胞分泌的IL-4、IL-10mRNA表达量的变化。 结果： 1.与正常组比较，轻度组和重度组派氏结内总CD3+T细胞比例上升(p0.05)，CD4+T细胞比例上升(p0.05)；CD8+T细胞比例下降(p0.05)；CD4/CD8比值升高(p0.05)；CD4+CD25+调节性T细胞比例减少(p0.05)。 2.通过RT-PCR法对各细胞因子mRNA表达量的变化检测，与正常组比较，轻度组和重度组中Th1类细胞分泌的IL-2和IFN-γ的表达量减少，Th2类细胞分泌的IL-4和IL-10的表达量逐渐升高。 结论： 1.肠道优势菌群失衡导致派氏结内T淋巴细胞构成比例发生变化，其中总T淋巴细胞比例随着失衡程度的加深不断升高，辅助性T细胞比例较失衡前升高，细胞毒性T细胞和调节性T细胞比例降低。 2.肠道优势菌群失衡导致派氏结内与体液免疫相关的IL-2和IFN-γ表达量升高，，与细胞免疫相关的IL-4和IL-10表达量降低，促使免疫反应向体液免疫方向偏移。
[Abstract]:Objective: The changes of the number of T lymphocytes and subsets and the expression of cytokines were analyzed before and after intestinal microflora imbalance in mice. To elucidate the effect of microflora imbalance on the structure and function of T lymphocytes in Pak's knots of mice. Methods: 1. The model of intestinal flora imbalance in mice was established by intragastric administration of ceftriaxone sodium. The final concentration of ceftriaxone sodium was 8 g / kg / d for 8 days. To establish the model of severe disequilibrium of microflora in mice; A model of mild microflora imbalance in mice was established by intragastric administration of ceftriaxone sodium at a dose of 4 g / kg / d for 4 days. 2.Epithelialization and collagenase 鈪

本文编号：1415857