兔眼前节缺血模型中血管内皮生长因子在眼前节组织中的表达及苏拉明对其抑制作用的研究

发布时间：2018-01-19 22:49

  本文关键词： 眼前节缺血 血管内皮生长因子 苏拉明 直肌离断术 酶联免疫吸附试验　出处：《河北联合大学》2011年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的: 通过离断兔眼多条直肌的方法建立眼前节缺血动物模型,检测兔眼前节缺血模型中眼前节组织中VEGF的表达情况,了解VEGF与眼前节缺血的关系,并探讨苏拉明对VEGF的抑制作用,为眼前节缺血的治疗提供思路和诊治依据。 材料与方法: 体重2.5±0.2kg的纯种大耳白兔54只,健康雄性,排除眼疾,随机分为正常假手术组18只兔(36只眼)与损伤组36只兔。并将损伤组分为损伤缺血组(36只眼,左眼),损伤治疗组(36只眼,右眼),其中正常假手术组,仅行球结膜环形剪开不建立眼前节缺血模型;损伤组同一大耳白兔左眼离断兔眼4条直肌后,兔眼球周注射平衡盐液1ml(损伤缺血组);右眼离断兔眼4条直肌后,球周注射苏拉明0.5mg(损伤治疗组),将各组按不同的时间点3小时、6小时、1天、3天、7天、14天,六个时间点分别于裂隙灯下观察各组眼前节的变化情况,然后取眼前节组织后,将动物处死;眼前节组织用做组织病理学检查,免疫组织化学检查,观察各个时间点VEGF在眼前节组织中的表达情况及治疗后情况,并用ELISA方法测定房水中VEGF浓度。所得数据资料均用SPSS13.0软件包进行统计分析。 结果: 1、大体观察:离断兔眼四条直肌后,损伤缺血组3小时出现结膜水肿,角膜透明,房水尚清,房闪(-),虹膜、瞳孔变化不大;6小时出现结膜水肿明显,角膜薄雾状水肿,房闪(+),虹膜、瞳孔变化不大;第1天即出现全结膜充血,角膜轻度水肿,房水轻混浊,房闪(++),虹膜、瞳孔变化不大;第3天角膜水肿加重,房水混浊,可见尘样KP,虹膜表面开始出现新生血管,房闪(++~+++),瞳孔轻度散大,呈竖椭圆形;第7天出现角膜水肿混浊,内皮皱褶,房水闪辉(+++),瞳孔散大,虹膜纹理不清,虹膜表面均可见新生血管,对光反射迟钝等;第14天角膜水肿、前房反应均减轻,房闪(+~++),角膜缘及虹膜可见新生血管;治疗组各时间点的角膜水肿程度、前房反应情况均较损伤缺血组减轻。 2、组织病理学检查结果显示: 损伤缺血组:术后3小时,角膜上皮细胞排列整齐,无水肿,基质层排列规整,虹膜上皮细胞完整,排列稍疏松,基质无水肿,有血管走行。6小时,角膜上皮细胞排列整齐,无水肿,基质层排列稍疏松,虹膜上皮细胞完整,排列疏松,基质稍水肿。第1天,角膜上皮细胞排列稍紊乱,角膜缘基质排列疏松;虹膜上皮细胞排列稍显疏松,未见明显的数量改变,细胞形态大致正常。第3天即出现角膜上皮细胞肿胀,基质内有炎细胞浸润;部分虹膜上皮细胞变性,基质水肿,白细胞附壁、游出。第7天角膜内皮细胞肿胀,部分脱落,基质层,血管扩张,炎细胞增多;虹膜色素上皮层明显水肿,空泡变性,染色质分布不均匀,可见炎细胞浸润,血管腔内白细胞数量增多。14天角膜缘部的浅层巩膜内仍可见大量炎细胞渗出,以淋巴细胞为主,红细胞游出;虹膜基质、上皮层水肿减轻,细小血管增多。损伤治疗组各时间点均较损伤组的细胞形态有明显的改善。 3、VEGF免疫组化结果:免疫组化结果显示,正常假手术组虹膜 血管内皮细胞有弱阳性的表达,损伤组术后虹膜上皮细胞及血管内皮细胞VEGF表达升高,以血管内皮细胞升高为主。VEGF免疫组化评分结果显示正常假手术组各时间点比较无差异(P0.05),损伤缺血组VEGF表达随时间延长表达逐渐增加,3小时开始升高,1天表达逐渐增加,7天表达到最高峰, 14天下降,相邻两组之间比较差异具有显著性(p0.05);各时间点正常假手术组与损伤缺血组比较,损伤缺血组VEGF表达明显增高,差异具有显著性(p0.05),损伤缺血组与损伤治疗组比较,损伤治疗组VEGF表达下降,两组比较差异具有显著性(p0.05)。 4、ELISA结果显示:正常假手术组房水中各时间点VEGF含量比较无显著性差异(P0.05),损伤缺血组VEGF含量随时间延长含量逐渐增加,3小时开始升高,1天表达逐渐增加,7天表达到最高峰, 14天下降,相邻两组比较差异具有显著性(p0.05);各时间点正常假手术组与损伤缺血组比较,损伤缺血组VEGF含量明显高于正常假手术组,两组比较差异具有显著性(p0.05),损伤缺血组与损伤治疗组比较,损伤治疗组VEGF含量较损伤缺血组下降,两组比较差异具有显著性(p0.05)。 结论: 1.兔眼可用于制备眼前节缺血模型; 2.兔眼多条直肌离断,造成兔眼前节缺血,虹膜组织中血管内皮细胞VEGF表达升高,房水中VEGF的浓度亦升高,提示其为该病的发病机制之一; 3.ASI早期球周注射苏拉明可以通过抑制VEGF表达,进而抑制促血管形成因素对眼前节组织的破坏作用对维持眼前节组织的形态和功能起到了重要的作用。
[Abstract]:Objective:
The establishment of anterior segment ischemia animal model by transection of rabbit eyes rectus, to detect expression of VEGF in rabbit eyes of anterior segment ischemia model in section tissues, understand the relationship between VEGF and anterior segment ischemia, and to investigate the inhibitory effect of Sura on VEGF, ideas and provide diagnostic evidence for treatment of anterior segment ischemia.
Materials and methods:
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本文编号：1445808