识别多种种属来源间充质干细胞核酸适配体的筛选及鉴定
本文关键词: 间充质干细胞 适配体 活细胞-SELEX 出处:《军事医学》2017年03期 论文类型:期刊论文
【摘要】:目的筛选能识别多种属来源的间充质干细胞(MSC)的核酸适配体,并对其进行鉴定。方法从幼兔股骨骨片分离MSC并进行成骨、成脂诱导分化鉴定。以分离得到的兔源性MSC为筛选靶标,利用细胞SELEX技术筛选核酸适配体。将第5轮富集文库进行克隆、测序,利用RNA structure、MEME软件分析获得候选序列,利用流式细胞仪鉴定候选适配体与兔、大鼠、人源性MSC的结合。结果从兔股骨骨片分离得到的MSC可诱导向成骨、成脂分化。经过5轮SELEX筛选获得兔MSC富集文库。候选适配体5-1-12不仅结合兔MSC,也识别大鼠和人源性MSC。结论活细胞SELEX筛选获得与多种属来源MSC结合的核酸适配体5-1-12。
[Abstract]:Objective to screen and identify the aptamers of mesenchymal stem cells (MSCs) from various genera. Methods MSC was isolated from femoral bone slices of young rabbits and osteogenesis was carried out. The aptamer of nucleic acid was screened by cell SELEX technique. The fifth enriched library was cloned and sequenced. The candidate sequences were obtained by RNA structuremmet software, and the candidate aptamers, rabbits and rats were identified by flow cytometry. Results MSC isolated from rabbit femur bone could induce osteogenesis. After five rounds of SELEX screening, rabbit MSC enrichment library was obtained. The candidate aptamer 5-1-12 not only binds to rabbit MSC. Conclusion SELEX screening of living cells obtained the aptamer 5-1-12 which binds to MSC from a variety of genuses.
【作者单位】: 广西医科大学;武汉市第三医院;湖北中医药大学;军事医学科学院基础医学研究所;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(81572846) 湖北省自然科学基金重点资助项目(2015CFA079)
【分类号】:R329.2
【正文快照】: 间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是来源于发育早期的中胚层和外胚层的一群多能干细胞,具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点。1976年首次在小鼠骨髓中分离得到MSC,随后发现多种组织中都可分离到MSC,如脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺
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,本文编号:1451209
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