琼脂磁珠消减SELEX技术筛选HIV P24抗原适配体
本文关键词: HIV P抗原 消减SELEX技术 DNA适配体 靶标替换 出处:《西北师范大学学报(自然科学版)》2016年05期 论文类型:期刊论文
【摘要】:建立以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,快速筛选高特异性、高亲和力的HIV P24抗原适配体的方法.利用消减SELEX技术及靶标替换的方法,以HIV P24抗原作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,进行6轮筛选,筛选到3条特异性核酸适配体.特异性检测表明,筛选得到的HIV P24抗原适配体与HIV P24抗原的结合解离常数均在纳摩尔级水平.该方法为HIV早期检测提供了新的检测技术,对适配体与靶分子相互作用机理的研究具有重要价值.
[Abstract]:To establish the carboxylated agar beads to screening medium, rapid screening of high specificity, high affinity HIV P24 antigen aptamer. Using subtractive SELEX technique and target replacement, with HIV P24 as target antigen, carboxylated agar beads as the carrier, the 6 round of screening, screened 3 specific nucleic acid aptamer. Specific detection results showed that, with the dissociation constant of screening HIV P24 antigen by aptamer P24 antigen and HIV were in the nanomolar level. This method provides a new detection technique for early detection of HIV, interaction mechanism research has important value for aptamer and target molecule.
【作者单位】: 西北师范大学生命科学学院;甘肃省医学科学研究院医学分子生物学研究中心;
【基金】:国家自然科学基金地区基金资助项目(30960104;30770639)
【分类号】:R392
【正文快照】: P24抗原是HIV-1的核心抗原,机体感染HIV-1后,P24在血清中出现的时间较早,一般在HIV-1感染后2~3周就可以检测,可作为艾滋病窗口期检测的血清标志物,通过检测血液中的P24,可达到早期诊断和治疗的目的[1].DNA适配体相比于抗体检测具有许多优点:1 DNA适配体更稳定,不易降解,可长期
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,本文编号:1464686
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