沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞迁移的影响

发布时间：2018-02-04 04:04

  本文关键词： ski RNA干扰 星形胶质细胞 Transwell细胞迁移实验 划痕实验 大鼠　出处：《中国康复理论与实践》2017年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的研究ski基因在大鼠星形胶质细胞迁移过程中的作用。方法分离大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski基因和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA转染组、阴性对照组和空白对照组。采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入大鼠星形胶质细胞。采用Western blotting检测各组ski蛋白的表达水平;采用Transwell细胞迁移实验和细胞划痕实验检测ski-siRNA转染后星形胶质细胞迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ski-siRNA转染组细胞内ski蛋白的相对表达水平显著降低(F=132.957,P0.001)。Transwell细胞迁移实验发现,ski-siRNA转染组每孔迁移细胞数少于空白对照组和阴性对照组(F47.197,P0.05)。细胞划痕实验显示,转染组细胞1~5 d的划痕愈合率均明显低于对照组(F69.187,P0.01)。结论沉默ski基因能显著抑制星形胶质细胞的迁移能力,ski可能参与星形胶质细胞的转移过程,进而调控胶质瘢痕的形成。
[Abstract]:Objective to study the role of ski gene in the process of astrocyte migration in rats. In vitro culture. Ski gene and negative control small interference fragments were synthesized. Ski-siRNA transfection group was set up. Negative control group and blank control group. SiRNA specific to ski gene and negative control siRNA were transferred into astrocytes of rats by liposome method. Western was used. The expression of ski protein was detected by blotting. The migration ability of astrocytes after transfection of ski-siRNA was detected by Transwell cell migration assay and cell scratch assay. The results were compared with those of blank control group and negative control group. The relative expression level of ski protein in the ski-siRNA transfected cells was significantly decreased by the migration assay of FN 132.957 (P0.001) .Transwell cells. The number of migration cells per well in ski-siRNA transfection group was less than that in blank control group and negative control group. The rate of scratch healing was significantly lower in transfection group than that in control group. Conclusion silencing ski gene can significantly inhibit the migration ability of astrocytes. Ski may be involved in the process of astrocyte metastasis and thus regulate the formation of glial scar.
【作者单位】： 兰州大学第二医院骨科;甘肃省骨关节疾病研究重点实验室;第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室创伤烧伤与复合伤国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.30772299) 兰州大学第二医院科研基金项目(No.sdkyjj-04)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 星形胶质细胞是中枢神经系统(central nervous1.2方法system,CNS)中数量最多、分布最广的胶质细胞,在1.2.1原代大鼠星形胶质细胞的培养、纯化和鉴定维持CNS内环境稳定、营养支持神经元、CNS创伤后大鼠在75%酒精中浸泡消毒,-20℃冰箱冷冻麻的功能修复等方面具有重要调节作用[1-

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本文编号：1489266