我国黑龙江林区鼠型动物巴尔通体感染调查与分离鉴定
发布时间:2018-03-02 21:20
本文选题:巴尔通体 切入点:鼠 出处:《中南大学》2012年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:目的:通过本研究了解我国东北林区鼠型动物的巴尔通体的感染情况,从黑龙江林区鼠型动物中分离培养巴尔通体,了解我国我国巴尔通体的遗传进化特征。 方法: 以军事医学科学院流行病室在黑龙江同江、绥芬河、东宁、牡丹江四个地区设置的蜱传疾病研究监测点作为本次研究野鼠捕获点。按照横断面现况调查研究的样本含量估算方法确定样本含量。 用夹夜法捕鼠,鉴定鼠种后,无菌取脾脏组织。按照试剂盒操作步骤提取脾脏组织DNA。采用巴尔通体特异性引物扩增gltA基因,gltA基因检测阳性作为标本阳性的判断标准。对阳性标本进一步扩增16S/23SrRNAITS基因片段,并送测序,进行同源比较和Neighbor-Joining (NJ)建树分析。将阳性标本的脾脏组织接种于巧克力琼脂平板上培养,对疑似菌落首先再次检测gltA基因,随后针对gltA基因阳性的分离株做:①进一步扩增16S/23SrRNAITS基因、16SrRNA基因、FtsZ基因来验证。②做形态学方面的鉴定,包括革兰氏染色、吉姆萨染色、光学显微镜、电子显微镜。③采用持续传代培养保存和冷冻保存。④送测序,与脾脏组织的测序结果比较。 数据处理采用率进行统计描述,率的组间比较用χ2检验、Fisher's确切概率法,阳性率影响因素的分析用逐步Logistic回归分析方法。运用SPSS16.0软件完成。 结果: 1.巴尔通体感染情况检测 本研究在2009~2011年中,每年的4-7月从黑龙江林区4个调查点共捕获野鼠514只,共11个种类。共71只检出巴尔通体DNA,阳性率为13.81%(95%CI:11.09%-17.06%),感染的鼠有仓鼠、大仓鼠、大林姬鼠、褐家鼠、黑线姬鼠、红背鼠平、,
本文编号:1558096
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