食物过敏幼鼠模型的建立与评价

发布时间：2018-03-11 19:04

本文选题：食物过敏　切入点：卵白蛋白　出处：《福建医科大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的利用3周龄SD幼鼠通过卵白蛋白腹腔注射进行基础致敏、灌胃激发建立幼鼠食物过敏动物模型并对其评价，探讨建立幼鼠食物过敏动物模型的适宜条件和评价方法。方法将16只3周龄的雌性SD幼鼠随机分为两组，每组8只。食物过敏组以卵白蛋白为过敏原，氢氧化铝为佐剂，通过腹腔注射致敏联合灌胃激发进行建模，即在第0天给予每只幼鼠腹腔注射低剂量卵白蛋白和氢氧化侣混悬液共0.2ml(含卵白蛋白40μg，氢氧化铝1mg)，在第2、4、7、9、11天腹腔注射低剂量卵白蛋白40μg(0.2mg/ml卵白蛋白溶液0.2ml)；在第20、24、28、30天给予高剂量卵白蛋白30mg(15mg/ml卵白蛋白溶液2.0ml)灌胃激发；空白对照组同期分别给予同等容量的生理盐水腹腔注射和灌胃。分别观察两组幼鼠体重增长、外观、活动度及排便等变化；酶联免疫吸附法检测两组幼鼠血清卵白蛋白特异性免疫球蛋白E含量；苏木精-伊红染色观察空肠、回肠、结肠黏膜形态变化和嗜酸性粒细胞浸润；甲苯胺蓝染色观察空肠、回肠、结肠黏膜肥大细胞密度及其完整性百分率进行幼鼠食物过敏模型评价。采用SPSS13.0软件包进行统计分析，α=0.05为显著性检验标准。结果 [1]两组幼鼠体重在第0、7、14、21天差别均无统计学意义(P均＞0.05)；在第28、30天，FA组、NS组幼鼠体重(g)分别为186.3±3.39、191.4±4.27和195.4±3.20、201.3±4.06，差别有统计学意义(P＜0.05)。FA组幼鼠在致敏激发后均出现不同程度竖毛，毛发失去光泽，活动减少或俯卧不动，抓耳挠腮或躁动不安，并出现排不成形稀便；NS组幼鼠无明显变化。 [2]致敏前(D0p)、第一次激发前(D20p)、最后一次激发后(D30a)FA组幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分别为6.19±1.05、10.34±1.28、13.17±1.43，NS组分别为6.11±1.13、6.17±1.08、6.31±1.05。随着基础致敏和灌胃激发，食物过敏组血清卵白蛋白特异性IgE水平明显升高，差别均有统计学意义(P＜0.05)；与空白对照组比较，在D20p、D30a食物过敏组幼鼠血清血清卵白蛋白特异性IgE含量明显升高，差别均有统计学意义(P＜0.01)；以血清血清卵白蛋白特异性IgE含量高于NS组X+3S作为致敏成功的阳性判定值所得，食物过敏组幼鼠致敏率为100%，空白对照组无一例致敏。 [3]苏木精-伊红染色光镜下观察，食物过敏组空肠、回肠、结肠肠黏膜不同程度损伤，其中，空肠黏膜损伤最明显，肠黏膜嗜酸性粒细胞浸润明显；其空肠、回肠、结肠每高倍视野嗜酸性粒细胞数(个/HPF)分别为26.6±5.9、18.2±3.2、13.0±2.8；NS组分别为7.8±1.4、7.6±1.6、6.2±1.3，FA组，两组比较差别均有统计学意义(P＜0.01)。 [4]甲苯胺蓝染色高倍镜下，食物过敏组空肠、回肠、结肠黏膜内见明显肥大细胞聚集伴脱颗粒；其空肠、回肠、结肠每高倍视野肥大细胞数(个/HPF)分别为9.8±2.3、5.9±2.0、4.4±1.3，空白对照组分别为2.3±0.3、2.0±0.4、1.3±0.3，两组比较差别均有统计学意义(P＜0.01)。食物过敏组空肠、回肠、结肠黏膜内肥大细胞完整性百分率(%)分别为22.3±2.6、42.9±4.9、57.5±2.9；空白对照组分别为80.1±4.6、83.8±4.5、85.1±4.8，，两组比较差别均有统计学意义(P＜0.01)。结论采用致敏原卵白蛋白与免疫佐剂氢氧化铝，通过低剂量卵白蛋白腹腔注射致敏联合高剂量卵白蛋白灌胃激发可以成功建立SD幼鼠食物过敏模型。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R-332

【参考文献】