恩度调控人脐静脉血管内皮细胞microRNAs表达及意义
本文选题：MicroRNAs 切入点：恩度 出处：《华中科技大学》2011年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的观察恩度对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells ,HUVECs)迁移及miR-126、miR-221、miR-222表达的影响,并初步探讨恩度通过调控microRNAs发挥抗血管生成的作用机制。 方法采用细胞划痕实验,测定50、100、200、500ng/ml恩度对HUVECs及血管内皮生长因子(VEGF)诱导下HUVECs迁移的影响;应用实时荧光定量RT-PCR技术,检测25、50、100、200、500ng/ml恩度对HUVECs干预前及干预1/2、1、2、4、8h后miR-126、miR-221及miR-222表达水平,并采用2~(-△△C)T法计算相对表达的倍数变化,以反映恩度对microRNAs表达的影响。 结果①不同浓度恩度均具有抑制HUVECs迁移的效应,且可下调VEGF对HUVECs的促迁移作用,并呈剂量依赖性;②miR-126、miR-221、miR-222在HUVECs中均高表达;③恩度显著下调miR-126的表达(0.07±0.01～0.56±0.04);相反,恩度明显上调miR-221(1.45±0.06～5.12±0.48)及miR-222(1.42±0.19～6.68±1.51)的表达;干预前后,miR-126、miR-221及miR-222表达水平差异有统计学意义(P㩳0.01);④在所观察范围内,恩度对miR-126、miR-221、miR-222的表达尚无时间及浓度依赖性; 结论恩度抑制HUVECs迁移,并显著影响HUVECs中miR-126、miR-221及miR-222表达,提示恩度存在通过调控microRNAs发挥抗血管生成作用的机制。
[Abstract]:Objective to observe the effect of Endol on the migration of human umbilical vascular endothelial cells and the expression of miR-126 miR-221 miR-222 in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), and to explore the mechanism of Endol on anti-angiogenesis by regulating microRNAs. Methods Cell scratch assay was used to determine the effect of 500ngr / ml of 50g / ml on HUVECs migration induced by HUVECs and vascular endothelial growth factor (VEGF), and the expression of miR-126miR-221 and miR-222 before and after 1 / 21248h of HUVECs intervention and 1 / 212248h, respectively, were detected by real-time quantitative RT-PCR technique, and the expression levels of miR-126miR-221 and miR-222 were detected by real-time quantitative RT-PCR. The multiple changes of relative expression were calculated by using the method of 2CT-T to reflect the influence of Endor on the expression of microRNAs. Results (1) different concentrations of HUVECs could inhibit the migration of HUVECs, and down-regulate the effect of VEGF on the migration of HUVECs in a dose-dependent manner. In a dose-dependent manner, the expression of miR-126 in HUVECs was significantly down-regulated by 3N, and the expression of miR-126 was significantly down-regulated by 0.07 卤0.01 ~ 0.56 卤0.04N. Endodendron upregulated the expression of miR-221(1.45 卤0.06 ~ 5.12 卤0.48) and miR-222(1.42 卤0.19 ~ 6.68 卤1.51. There were significant differences in the expression of miR-126 miR-221 and miR-222 before and after intervention (P < 0.05). The expression of miR-126 miR-221 and miR-222 was not time-and concentration-dependent. Conclusion Endor inhibits the migration of HUVECs and significantly affects the expression of miR-126 miR-221 and miR-222 in HUVECs, suggesting that Endox may play an antiangiogenic role by regulating microRNAs.
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R363
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，本文编号：1623899
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