双荧光标记的胶质瘤原位移植瘤模型的建立

发布时间：2018-03-22 07:14

  本文选题：神经胶质瘤　切入点：荧光　出处：《中国比较医学杂志》2017年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的建立一种稳定、可实时监测的胶质瘤原位移植瘤裸鼠模型。方法用带有荧光素酶(luciferase-Luc)和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein-GFP)基因的慢病毒感染U251神经胶质瘤细胞,流式细胞仪筛选稳定表达GFP-Luc荧光的细胞系,并通过CCK-8实验、细胞周期实验、Transwell肿瘤迁移及侵袭实验等评价荧光细胞的增殖、迁移和侵袭能力是否改变;将细胞接种至裸鼠大脑尾状核,建立胶质瘤原位移植瘤模型,利用小鼠活体成像系统监测脑内肿瘤的生长情况,并通过石蜡切片,HE染色评价细胞在裸鼠脑内的病理特征及成瘤能力。结果成功构建稳定表达GFP荧光和luciferase荧光的U251胶质瘤细胞系及动物模型,慢病毒整合并未改变细胞的增殖、迁移及侵袭能力;模型生长周期适中,成瘤率高,瘤体在颅内生长稳定,HE切片符合人胶质瘤特征。结论双荧光标记的胶质瘤细胞相比于传统细胞更有利于胶质瘤动物模型的实验研究;U251-GFP-Luc胶质瘤细胞裸鼠模型,其肿瘤生长和病理特性与人胶质瘤相似,且可实时观察肿瘤生长,可作为胶质瘤实验研究的理想动物模型。
[Abstract]:Objective to establish a stable, real-time monitoring nude mouse model of glioma transplanted in situ. Methods U251 glioma cells were infected with lentivirus with luciferase-luciferase-luciferase-luciferase-gene and green fluorescent protein-GFP gene. The cell lines stably expressing GFP-Luc fluorescence were screened by flow cytometry, and the proliferation, migration and invasion ability of fluorescent cells were evaluated by CCK-8 assay, cell cycle assay and transwell tumor migration and invasion assay. Cells were inoculated into caudate nucleus of brain of nude mice to establish the model of glioma orthotopic transplantation. The growth of brain tumors was monitored by living imaging system in mice. The pathological characteristics and tumorigenic ability of the cells in the brain of nude mice were evaluated by paraffin section HE staining. Results U251 glioma cell lines and animal models stably expressing GFP fluorescence and luciferase fluorescence were successfully constructed. The integration of lentivirus did not change the proliferation of U251 glioma cells. The growth cycle of the model was moderate and the rate of tumorigenesis was high. Conclusion double fluorescence labeled glioma cells are more favorable to glioma animal model than traditional glioma cells in the experimental study of U251-GFP-Luc glioma cells in nude mice. Its tumor growth and pathological characteristics are similar to those of human glioma, and it can be used as an ideal animal model for the experimental study of glioma.
【作者单位】： 厦门大学医学院;福建医科大学;厦门大学附属中山医院;厦门大学药学院;
【基金】：国家自然科学基金(编号:30970733)
【分类号】：R-332;R739.41

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