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氯通道阻断剂对一氧化氮诱导培养大鼠海马神经元凋亡的影响

发布时间:2018-04-10 03:20

  本文选题:多聚腺苷核糖聚合酶-1 切入点:3-吗啉斯德酮亚胺 出处:《遵义医学院》2011年硕士论文


【摘要】:目的:探讨氯通道阻断剂(DIDS)对一氧化氮(NO)供体SIN-1诱导大鼠海马神经元凋亡及其PARP-1和AIF蛋白表达的影响。 方法:采用培养12天的SD大鼠海马神经元,在确定SIN-1和DIDS的最佳使用浓度后,分为control组、SIN-1组、SIN-1+DIDS组,其中药品作用时间是18小时,采用MTT法检测细胞存活率、Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡、细胞免疫荧光染色和Western blot检测相关蛋白PARP-1与AIF的表达。 结果:(1)SIN-1诱导神经元凋亡具有浓度依赖性,1.0mmol/L的SIN-1可显著诱导神经元发生死亡。(2)氯通道阻断剂DIDS能明显提高细胞生存率,抑制SIN-1诱导培养海马神经元凋亡的毒性作用。(3)SIN-1诱导神经元凋亡后可以引起PARP-1与AIF蛋白表达增强。(4)氯通道阻断剂DIDS可以明显降低SIN-1诱导的海马神经元凋亡过程中的PARP-1和AIF的增加。 结论:氯通道阻断剂DIDS可能通过影响PARP-1/AIF非caspase依赖凋亡途径而对损伤神经元进行保护。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of chloride channel blocker (DIDS) on the apoptosis of hippocampal neurons and the expression of PARP-1 and AIF protein in hippocampal neurons of rats induced by nitric oxide (no) donor SIN-1.Methods: the hippocampal neurons of SD rats were cultured for 12 days. After determining the optimal concentration of SIN-1 and DIDS, they were divided into control group (SIN-1 group) and SIN-1 group (SIN-1 DIDS group).MTT assay was used to detect cell viability and Hoechst33258 fluorescence staining was used to detect cell apoptosis. Cellular immunofluorescence staining and Western blot were used to detect the expression of PARP-1 and AIF.Results SIN-1 (1.0 mmol / L) induced neuronal apoptosis in a concentration-dependent manner could significantly induce neuronal death. DIDS, a chloride channel blocker, could significantly improve the cell survival rate.Inhibition of apoptosis of cultured hippocampal neurons induced by SIN-1. After inducing apoptosis of hippocampal neurons induced by SIN-1, DIDS could significantly reduce the increase of PARP-1 and AIF in the apoptosis process of hippocampal neurons induced by SIN-1, which could induce the increased expression of PARP-1 and AIF protein. DIDS, a chloride channel blocker, could significantly reduce the increase of PARP-1 and AIF in the process of apoptosis of hippocampal neurons induced by SIN-1.Conclusion: DIDS, a chloride channel blocker, may protect injured neurons by influencing PARP-1/AIF non-#en2# dependent apoptosis pathway.
【学位授予单位】:遵义医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R363

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