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发布时间:2018-04-26 14:16
本文选题:P + 过氧化氢酶 ; 参考:《中国人兽共患病学报》2017年03期
【摘要】:目的构建巴西诺卡菌P61基因原核重组表达载体,在大肠杆菌中表达具有生物活性的P61蛋白,为P61蛋白的进一步相关研究提供实验基础。方法通过基因合成的方法合成P61基因,将其插入到质粒pET30a(+)载体并导入BL21大肠杆菌,应用IPTG进行诱导表达。通过Western Blot对表达产物进行分析。应用过氧化氢酶检测试剂盒检测其过氧化氢酶活性。结果 P61蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且具有较高的过氧化氢酶活性,能被感染巴西诺卡菌的小鼠血清识别。结论成功构建了巴西诺卡菌P61蛋白的原核表达质粒,并能在原核表达宿主E.coli BL21中进行高效表达,且表达产物具有过氧化氢酶活性。
[Abstract]:Objective to construct the prokaryotic expression vector of P61 gene of Nocardia brasiliensis and express the bioactive P61 protein in Escherichia coli. Methods P61 gene was synthesized by gene synthesis, inserted into plasmid pET30a () vector and introduced into BL21 Escherichia coli. IPTG was used to induce expression. The expressed product was analyzed by Western Blot. The catalase activity was detected by catalase assay kit. Results P61 protein was soluble expressed in Escherichia coli and had high catalase activity, which could be recognized by the sera of mice infected with Nocardia brasiliensis. Conclusion the prokaryotic expression plasmid of P61 protein of Nocardia brasiliensis was successfully constructed, and it was highly expressed in the prokaryotic expression host E.coli BL21, and the expressed product had catalase activity.
【作者单位】: 传染病预防控制国家重点实验室 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所;
【基金】:863课题(No.2014AA021404) 国家科技重大专项(No.2013ZXl0004221) 公益性卫生行业专项(No.201302006)联合资助~~
【分类号】:R378
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,本文编号:1806387
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