T3对无血清培养成年鼠心肌细胞的保护作用及Fas系统相关机制研究
本文选题：T3 + 大鼠 ； 参考：《南昌大学》2011年硕士论文
【摘要】：目的：建立体外无血清饥饿培养成年鼠心肌细胞模型,利用药物三碘甲状腺原氨酸(T3)干预,观察T3对无血清培养成年鼠心肌细胞是否具有保护作用及与Fas系统表达的关系。 方法：无血清M199培养基原代培养成年鼠心肌细胞,光镜下观察细胞形态,台盼蓝染色评价细胞活性、计数,心肌细胞随机分为对照组、T3组,培养48小时后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,Western blotting测定Fas、FasL蛋白在心肌细胞的表达变化。 结果：每只成年SD大鼠细胞产量可获得(4-7)x 106个,其中75%-85%复钙后为具有活性的心室肌细胞,细胞呈杆状、横纹清晰、折光性好、两端边缘锐利,其中5%-10%杆状细胞有自发性收缩；T3对无血清培养成年鼠心肌细胞具有保护作用：心肌细胞无血清培养48小时后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡T3组心肌细胞凋亡率(13.26±2.46%)较对照组(44.32±6.12%)明显降低(P0.05);Western blotting检测结果提示T3组较对照组Fas、FasL表达减弱。 结论：T3可以减少无血清培养成年鼠心肌细胞凋亡,可能与减弱心肌细胞Fas/FasL基因表达有关。
[Abstract]:Aim: to establish a model of cultured adult rat cardiomyocytes without serum starvation in vitro, and to observe the protective effect of T3 on serum free cultured adult rat cardiomyocytes and its relationship with the expression of Fas system with the intervention of triiodothyronine (T3). Methods: primary cultured adult rat cardiomyocytes were cultured on serum-free M199 medium. Cell morphology was observed under light microscope. Trypan blue staining was used to evaluate cell activity and count. Cardiomyocytes were randomly divided into control group (T 3 group) and cultured for 48 hours. The expression of Fas-FasL protein in cardiomyocytes was detected by flow cytometry and Western blotting. Results: the cell yield of each adult SD rat could be obtained by 4-7X 106, of which 75% -85% of them were active ventricular myocytes after recalcium. The cells were rod-shaped, clear striation, good refraction, sharp edge at both ends. Among them, 5-10% rod cells had spontaneous contraction of T _ 3, which had protective effect on adult rat cardiomyocytes cultured without serum: after 48 hours of serum-free culture of cardiac myocytes, The expression of Fas-FasL in T3 group was significantly lower than that in control group (44.32 卤6.12) by flow cytometry. The results showed that the expression of Fas-FasL in T3 group was lower than that in control group. ConclusionThree 3 can reduce the apoptosis of cardiac myocytes in serum-free adult rats, which may be related to the decrease of Fas/FasL gene expression in cardiac myocytes.
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329
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，本文编号：1817557
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