人骨髓间充质干细胞过表达白细胞介素-34对THP-1细胞的调节作用

发布时间：2018-05-11 09:13

  本文选题：人骨髓间充质干细胞 + 白细胞介素-　； 参考：《生物工程学报》2017年04期

【摘要】：构建人IL-34真核表达载体并将其转染到人骨髓间充质干细胞,观察高表达IL-34的骨髓间充质干细胞对THP-1细胞的影响。PCR扩增IL-34 DNA,并将其克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP;将构建成功的重组体转染到骨髓间充质干细胞,Western blotting和ELISA分析IL-34在细胞中的表达;用高表达IL-34的骨髓间充质干细胞培养上清液来培养THP-1细胞,Real-time PCR分析THP-1细胞中IL-10和TNFα的表达变化。经双酶切和测序鉴定,成功构建了pIRES2-EGFP-IL-34重组体;转染至骨髓间充质干细胞的IL-34可以促进THP-1细胞表达IL-10和TNFα。结果表明,骨髓间充质干细胞表达分泌的IL-34对THP-1有调节作用。
[Abstract]:The human IL-34 eukaryotic expression vector was constructed and transfected into human bone marrow mesenchymal stem cells, and the effect of bone marrow mesenchymal stem cells with high expression of IL-34 on THP-1 cells was observed and IL-34 DNA was amplified by.PCR, and it was cloned to eukaryotic expression vector pIRES2-EGFP, and the constructed recombinant was transfected into bone marrow mesenchymal stem cells, Western blotting and ELI. The expression of IL-34 in cells was analyzed by SA; THP-1 cells were cultured with supernatant of bone marrow mesenchymal stem cells with high expression of IL-34. The expression of IL-10 and TNF alpha in THP-1 cells was analyzed by Real-time PCR. The pIRES2-EGFP-IL-34 recombinant was successfully constructed by double enzyme digestion and sequencing, and the IL-34 of transfected to bone marrow mesenchymal stem cells could be promoted. THP-1 cells were used to express IL-10 and TNF alpha. The results showed that IL-34 expressed in bone marrow mesenchymal stem cells had a regulatory effect on THP-1.

【作者单位】： 宁波市第二医院;
【基金】：宁波市自然科学基金(No.2016A610139) 宁波科技创新团队项目(No.2011B82016)资助~~
【分类号】：R329.2

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本文编号：1873346