实验用小型猪乙型脑炎病毒的分离鉴定

发布时间：2018-06-01 02:11

本文选题：乙型脑炎病毒 + 分离　；参考：《中国比较医学杂志》2017年03期

【摘要】：目的了解小型猪感染乙型脑炎病毒株的特点。方法猪脑组织经过处理,接种BHK21细胞,进行病毒培养、间接免疫荧光试验、中和试验、电镜观察,及通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离毒株E区段和PrM区段核苷酸序列,测序后进行基因型鉴定。结果 25只猪脑组织接种BHK_(21)细胞,有3个组织处理液能使BHK21细胞发生圆缩、集聚等病变;3个组织接种的BHK_(21)病变细胞滴片进行免疫荧光试验,均产生强绿色荧光反应;中和实验结果显示3株新分离株中和效价均为1∶64;电镜下可见直径40nm左右球型病毒粒子;RT-PCR产物测序结果与疫苗株E区段核苷酸比较同源性均为95%;3株新分离株均为GIII型乙脑病毒。结论实验表明小型猪场存在乙型脑炎病毒感染,为GIII型乙型脑炎病毒。
[Abstract]:Objective to investigate the characteristics of Japanese encephalitis virus infection in miniature pigs. Methods Pig brain tissues were treated, inoculated with BHK21 cells, cultured with virus, detected by indirect immunofluorescence assay, neutralized, observed by electron microscope, and amplified by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The genotypes were identified after sequencing. Results of the 25 pig brain tissues inoculated with BHKS21) cells, 3 tissue treatments could make the BHK21 cells round and accumulate, and the three tissues inoculated with BHKS21) had a strong green fluorescence reaction. The neutralization titers of the three new isolates were all 1: 64, and the sequencing results of RT-PCR products of spherical virus particles with diameter of about 40nm were 95% and 95%, respectively, compared with the E region of the vaccine strain under electron microscope. GIII encephalitis B virus. Conclusion the results showed that there was encephalitis B virus infection in small pig farms and it was GIII type B encephalitis virus.
【作者单位】：中国食品药品检定研究院国家实验动物微生物遗传检测中心;
【分类号】：R-332;R512.32

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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