淋病奈瑟菌WHO-A株Cas蛋白的表达和多克隆抗体制备

发布时间：2018-06-06 00:29

  本文选题：淋病奈瑟菌 + Cas蛋白　； 参考：《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2017年01期

【摘要】：为研究淋病奈瑟菌CRISPR系统中Cas蛋白的结构与功能,以WHO-A株基因组DNA为模板,利用PCR技术克隆出CT和TM 2个Cas基因,在大肠埃希菌中进行原核表达。分别用pCold-TF表达的CT和TM重组蛋白免疫小鼠制备Cas抗体;以pGEX-6p-1表达的CT和TM重组蛋白为检测抗原测定免疫血清中特异性抗体的效价。结果表明:获得了与预期分子量大小一致的重组抗原,间接ELISA检测表明,小鼠免疫血清中CT和TM抗体的效价分别为1∶25 600、1∶12 800。结果说明为细胞外探索淋病奈瑟菌中Cas蛋白的作用机制和细胞内检测相关蛋白的含量提供了试验材料。
[Abstract]:In order to study the structure and function of Cas protein in CRISPR system of Neisseria gonorrhoeae, two Cas genes (CT and TM) were cloned by PCR using genomic DNA of WHO-A strain and expressed in E. coli. Cas antibody was prepared by immunizing mice with CT and TM recombinant protein expressed by pCold-TF, and the titer of specific antibody in immunized serum was detected by pGEX-6p-1 expressed CT and TM recombinant protein. The results showed that the recombinant antigen was obtained in accordance with the expected molecular weight. Indirect ELISA analysis showed that the titers of CT and TM antibodies in mouse immunized serum were 1:25 600: 1: 12800, respectively. The results showed that the results provided experimental materials for extracellular exploration of the mechanism of Cas protein in Neisseria gonorrhoeae and detection of related proteins in cells.
【作者单位】： 扬州大学医学院/江苏省中西医结合老年病防治重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81471906) 江苏省高校自然科学基金资助项目(14KJB310025) 扬州大学科技创新团队培养对象资助项目(201609)
【分类号】：R392

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本文编号：1984140