血管紧张素-（1-7）对THP-1源性泡沫细胞胆固醇外流的影响及机制探讨

发布时间：2018-08-12 19:21

【摘要】：目的本实验通过构建THP-1源性泡沫细胞模型，探讨Ang-（1-7）和腺苷酸环化酶的抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白ABCA1表达和胆固醇含量的影响。进一步阐明Ang-（1-7）抑制动脉粥样硬化形成的机制。 方法培养THP-1源性单核细胞，用佛波酯（PMA）（160 nmol/L）诱导为巨噬细胞，加入终浓度为50 mg/L的ox-LDL建立泡沫细胞模型。实验分为4组，A组：正常泡沫细胞组；B组：腺苷酸环化酶抑制剂MDL组（简称MDL组）；C组：Ang-（1-7）组；D组：MDL+Ang-（1-7）组。处理24 h后，ELISA法检测各组细胞cAMP表达水平，实时荧光定量RT-PCR法和Western-blot检测各组细胞ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量，闪烁计数法检测各组细胞胆固醇流出率，高效液相法检测各组细胞胆固醇含量。 结果（1）MDL组与泡沫细胞组相比cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量及胆固醇流出率明显降低（P 0.05），细胞内胆固醇含量增高（P 0.05）；Ang-（1-7）组cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显升高（P 0.05），胆固醇流出率增高（P 0.05），胆固醇含量显著降低（P 0.05）；（2）与Ang-（1-7）组比较，MDL+Ang（-1-7）组cAMP表达水平、ABCA1mRNA相对表达含量、ABCA1蛋白含量明显降低（P 0.05），胆固醇流出率降低（P 0.05），胆固醇含量增高（P 0.05）。 结论（1）Ang-（1-7）能促进泡沫细胞ABCA1表达增加，增加胆固醇流出率，减少泡沫细胞胆固醇含量，逆转泡沫细胞的形成。（2）MDL可以抑制腺苷酸环化酶的活性，减少cAMP的生成，从而部分拮抗Ang-（1-7）的上述作用，但不能完全阻断Ang-（1-7）的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of Ang- (1-7) and adenylate cyclase inhibitor (MDL) on the expression of cholesterol reverse transporter associated protein (ABCA1) and cholesterol content in THP-1 derived foam cells. To further elucidate the mechanism of Ang- (1-7) inhibiting atherosclerosis. Methods THP-1 derived monocytes were cultured and induced into macrophages by phorbol ester (PMA) (160 nmol/L. The foam cell model was established by adding 50 mg/L ox-LDL. The experiment was divided into 4 groups: normal foam cell group (group B): adenylate cyclase inhibitor MDL group (MDL group) and C group (group C) and D group (group D: MDL Ang- (1-7). After 24 h treatment, cAMP expression was detected by Elisa, relative ABCA1 mRNA expression and protein content were detected by real-time fluorescence quantitative RT-PCR and Western-blot, and cholesterol efflux was detected by scintillation counting. Cholesterol content was detected by HPLC. Results (1) the relative expression of ABCA1 mRNA in MDL group was significantly lower than that in foam cell group. The protein content and cholesterol efflux rate of ABCA1 mRNA in MDL group were significantly lower than those in foam cell group (P 0.05), and the intracellular cholesterol content was increased (P 0.05). In Ang- (1-7) group, the relative expression of ABCA1 mRNA and the protein content of ABCA1 were significantly increased (P0. 05), the cholesterol efflux rate was increased (P0. 05), and the content of cholesterol was significantly decreased (P0. 05). (2) compared with Ang- (1-7) group, the level of cAMP expression in MDL Ang (-1-7) group was significantly lower than that in Ang- (1-7) group. The relative expression of ABCA1 mRNA and ABCA1 protein content in MDL Ang (-1-7) group were significantly lower than those in Ang- (1-7) group. Conclusion (1) Ang- (1-7) can increase the expression of ABCA1, increase the cholesterol efflux rate, decrease the cholesterol content and reverse the formation of foam cells. (2) MDL can inhibit the activity of adenylate cyclase and reduce the production of cAMP. The above effects of Ang- (1-7) were partly antagonized, but the effects of Ang- (1-7) could not be completely blocked.
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

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本文编号：2180097