抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的制备及其免疫学特性

发布时间：2018-08-16 07:37

【摘要】：利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾脏细胞与杂交瘤细胞融合,筛选出2株能稳定分泌抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3和2F4。体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,经纯化后,得到2株均为Ig G1型的单克隆抗体m Ab1E3和m Ab2F4。间接ELISA方法测得m Ab1E3的效价达到1∶4.10×10~5,对Gly m Bd 28K蛋白的半数抑制率(IC_(50))为23.99μg·L~(-1),与花生蛋白、核桃蛋白等的交叉反应率均低于0.1%。该单克隆抗体的制备为Gly m Bd 28K致敏蛋白的检测以及抗原表位的鉴定奠定了基础。
[Abstract]:BALB/c female mice were immunized with Gly m Bd 28K natural protein. Two hybridoma cell lines, 1E3 and 2F4, which could stably secrete monoclonal antibody against Gly m Bd 28K, were selected from spleen cells of mice and hybridoma cells fused with hybridoma cells. After purification, two monoclonal antibodies m Ab1E3 and mAb2F4 were obtained. The titer of m Ab1E3 by indirect ELISA method was 1: 4.10 脳 10 ~ 5, the IC50 of Gly m Bd 28K protein was 23.99 渭 g / L ~ (-1), and the cross reaction rate with peanut protein and walnut protein was lower than 0.1%. The preparation of this monoclonal antibody laid a foundation for the detection of Gly m Bd 28K sensitized protein and the identification of antigenic epitopes.
【作者单位】： 河南工业大学粮油食品学院;
【基金】：国家自然科学基金(31301409) 河南工业大学自然科学基础研究培育计划(2014JCYJ01)
【分类号】：R392

【参考文献】

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3 高学梅;席俊;陆启玉;;大豆中主要过敏原的研究现状和展望[J];粮食与油脂;2014年12期

4 史巧巧;席俊;陆启玉;;苯并芘人工抗原的合成及鼠源多克隆抗血清的制备[J];食品科技;2013年12期

5 杜智欣;李桂芬;马洁;孔君;鲁洁;朱水芳;;两种抗原制备黄瓜花叶病毒多克隆抗体的比较研究[J];植物检疫;2013年03期

6 龚芳;职爱民;李青梅;胡骁飞;赵启发;张小辉;陆启玉;张改平;;分泌抗春雷霉素单克隆杂交瘤细胞株的建立及免疫学特性鉴定[J];中国农业科学;2013年02期

7 曾蕊;宋波;拓云;吴帅;蓝岚;姜自芹;刘珊珊;;大豆致敏蛋白及其清除方法的研究进展[J];大豆科学;2011年06期

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9 胡鲲;黄宣运;姜有声;方伟;杨先乐;;环丙沙星单克隆抗体的制备及其免疫学特性分析[J];中国免疫学杂志;2010年06期

【共引文献】

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2 张强;崔百明;郑银英;向本春;;新疆加工番茄上南方番茄病毒外壳蛋白基因的克隆与原核表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2015年04期

3 张强;陈英杰;向本春;郑银英;;辣椒上CMV亚组ⅠB CP基因克隆与原核表达[J];新疆农业科学;2014年12期

4 王慈;曹敏杰;郑晓江;詹春兰;刘光明;蔡秋凤;;鲢小清蛋白的cDNA克隆及在大肠杆菌中的原核表达[J];中国水产科学;2014年04期

5 余宇燕;邹艳辉;邱亚利;滕海英;;石杉碱甲快速检测酶联免疫试剂盒的制备[J];中国免疫学杂志;2014年01期

6 吴建祥;王震成;金仁耀;刘欢;周崇盈;张少恩;;抗氟喹诺酮类抗生素单抗的研制及其检测应用[J];核农学报;2013年12期

7 龚育清;杨安树;陈红兵;祖琴琴;;基于生物技术控制大豆过敏原的研究进展[J];食品工业科技;2014年10期

8 李慧静;周惠明;朱科学;彭伟;郭晓娜;;豆基婴幼儿配方粉的研究进展[J];大豆科学;2013年02期

9 夏凯;李建科;于振;;酸土环脂芽孢杆菌的鼠源多克隆抗体制备及纯化[J];食品工业科技;2012年15期

10 刘光明;曹敏杰;蔡秋凤;沈海旺;阮韦伟;苏文金;;水产品过敏原的研究现状和展望[J];中国食品学报;2012年05期

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5 冯彦娟;袁娟丽;佟平;陈红兵;高金燕;;大豆过敏原的检测方法研究进展[J];食品科学;2012年23期

6 杨慧;陈红兵;程伟;高金燕;李欣;;大豆主要过敏原及其脱敏方法的研究进展[J];食品科学;2011年21期

7 邹菊;刘志刚;;大豆主要过敏原Gly m Bd 30K蛋白单克隆抗体的制备与应用[J];大豆科学;2011年05期

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10 蔡秋凤;刘光明;王瑞芳;王锡昌;苏文金;曹敏杰;;鱼类主要过敏原小清蛋白的检测[J];中国免疫学杂志;2010年08期

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3 孙国凤;;单克隆抗体药品在日本通过调查会[J];生物技术通报;1991年09期

4 ;一种制备单克隆抗体的更有效而经济的方法[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);1998年05期

5 章波,陈惠鹏,范国才,陈吉中,王清明;抗人肝再生增强因子单克隆抗体的研制[J];免疫学杂志;2000年06期

6 李凤英,陈名道,顾卫琼,陈春荣,唐金凤;人瘦素单克隆抗体的鉴定[J];放射免疫学杂志;2000年02期

7 陈志南,蒋建利;单克隆抗体——从鼠到人[J];国外医学(免疫学分册);2000年03期

8 田克恭;单克隆抗体在病毒性疾病治疗中的应用现状[J];实验动物科学与管理;2000年01期

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10 孙茂华;王永山;周宗安;;抗μ链单克隆抗体的应用[J];南京部队医药;2001年04期

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2 刘大维;高斌;;狂犬病毒单克隆抗体的研制[A];2010年中国科学院微生物研究所博士后学术年会暨第二届博谊论坛论文摘要集[C];2011年

3 彭虹;舒翠丽;刘永全;王华;高杰英;;抗人α4单克隆抗体的制备和鉴定[A];中国免疫学会第四届学术大会会议议程及论文摘要集[C];2002年

4 张光波;董秋明;於葛华;李文香;张学光;;一株鼠抗人4-1BB单克隆抗体的研制及其生物学功能的鉴定[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年

5 张锦超;杨金菊;吴琼;李戬;陈勇;李辉;宋颖博;罗晓彤;任飞;高媛;杜雪梅;鞠艳芳;王兆卿;王京兰;徐菡;柳晓兰;崔玉芳;钱小红;贺福初;高建恩;孙启鸿;;高效鉴定单克隆抗体所识别未知抗原技术平台的建立及应用[A];中国蛋白质组学第二届学术大会论文摘要论文集[C];2004年

6 杨永昌;王北宁;赖春宁;黎燕;;抗血小板单克隆抗体重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

7 孙效;高新;尚明美;宋海峰;汤仲明;;抗胰高血糖素样肽单克隆抗体的制备[A];第八次全国药物与化学异物代谢学术会议论文摘要[C];2006年

8 杨智红;熊承良;;尿激酶型纤溶酶原激活因子单克隆抗体的制备及鉴定[A];湘鄂赣首届性与生殖健康学术研讨会论文汇编[C];2007年

9 李伟;林志;齐卫红;梁春男;杨艳伟;汪巨峰;李波;;抗VEGF单克隆抗体的临床前安全性评价[A];2013年（第三届）中国药物毒理学年会暨药物非临床安全性评价研究论坛论文摘要[C];2013年

10 李伟;林志;齐卫红;梁春男;杨艳伟;汪巨峰;李波;;抗VEGF单克隆抗体的临床前安全性评价[A];中国药理学与毒理学杂志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

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2 编译 李勇;单克隆抗体：生物类似药开发的秘钥[N];医药经济报;2014年

3 广凯;单克隆抗体药物将有大发展[N];中国医药报;2000年

4 ;单克隆抗体应用前景看好[N];中国医药报;2002年

5 毛文波;单克隆抗体：征服癌症的新方法[N];科技日报;2004年

6 邹平;单克隆抗体研究取得突破[N];医药经济报;2001年

7 记者 张孟军;美成功用鸡生产全功能人单克隆抗体[N];科技日报;2005年

8 编译 李勇;单克隆抗体：开发生物类似物的秘钥[N];中国医药报;2014年

9 唐之康;单克隆抗体用于治疗MS[N];中国医药报;2005年

10 记者 胡德荣;肠道病毒EV71单克隆抗体研究获进展[N];健康报;2012年

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7 秦迎松;人促血液血管细胞生成素（Haemangiopoietin, HAPO）单克隆抗体的制备、鉴定及应用[D];中国协和医科大学;2004年

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9 李振宇;抗FVⅢ-C2区单克隆抗体的制备及功能研究[D];苏州大学;2009年

10 夏永娟;抗鳗弧菌独特型单克隆抗体的研制[D];第四军医大学;2000年

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5 居颂光;三株抗人促红细胞生成素单克隆抗体的获得及其生物学特性的研究[D];苏州大学;2001年

6 朱小兵;抗五种赤潮藻的单克隆抗体的制备和特性分析[D];暨南大学;2003年

7 朱爱萍;人神经元特异性烯醇化酶的基因克隆及单克隆抗体的制备和鉴定[D];山西医科大学;2004年

8 刘进军;人巨噬细胞移动抑制因子的原核表达及其单克隆抗体的制备[D];第三军医大学;2005年

9 刘莉;混合抗原免疫结合蛋白质芯片通量化制备单克隆抗体体系的初步建立[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年

10 王维;高迁移率族蛋白B1单克隆抗体的制备及其在竞争ELISA中的应用[D];天津医科大学;2007年

，

本文编号：2185310