星形胶质细胞与GnRH神经元共培养可通过谷氨酸受体介导促进GnRH神经元分泌

发布时间：2018-08-23 13:26

【摘要】：目的探讨下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)神经元与星形胶质细胞共培养对GnRH神经元的影响及其可能的相关机制。方法利用Transwell共培养系统,将GnRH神经元细胞株GT1-7与原代星形胶质细胞共培养10d。免疫组织化学法检测GnRH神经元中谷氨酸受体(GluR)的分布,蛋白免疫印迹法检测GluR在GnRH神经元中的表达,并分别通过高效液相色谱法和酶联免疫吸附法检测培养上清中的谷氨酸(Glu)和GnRH的浓度变化。结果共培养组的GnRH神经元发生mGluR5和GluR1/2/3/4从胞质到胞核的移位,在胞核中的表达较单纯GT1-7培养组显著增加(P0.05),且Western-blot检测与免疫荧光检测结果一致。HPLC和ELISA检测结果表明,与单纯GT1-7培养组比较,共培养组上清中的Glu浓度显著减少,而GnRH的分泌则明显增加(P0.05)。结论 GnRH神经元与星形胶质细胞共培养可通过改变GluR(代谢型或离子型)在细胞内的定位与表达,从而增加GnRH的分泌。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hypothalamic gonadotropin-releasing hormone (GnRH) neurons co-cultured with astrocytes on GnRH neurons and its possible mechanisms. Methods GnRH neuron cell line GT1-7 and primary astrocytes were co-cultured for 10 d with Transwell co-culture system. The distribution of glutamate receptor (GluR) in GnRH neurons was detected by immunohistochemistry and the expression of GluR in GnRH neurons was detected by Western blot. The concentrations of glutamate (Glu) and GnRH in culture supernatant were detected by HPLC and Elisa, respectively. Results mGluR5 and GluR1/2/3/4 were translocated from cytoplasm to nucleus in co-cultured GnRH neurons, and the expression of mGluR5 and GluR1/2/3/4 in nucleus was significantly higher than that in GT1-7 cultured group (P0.05). The results of Western-blot detection were consistent with those of immunofluorescence assay. Compared with the group of GT1-7 alone, the concentration of Glu in supernatant of co-culture group was significantly decreased, while the secretion of GnRH was significantly increased (P0.05). Conclusion Co-culture of GnRH neurons and astrocytes can increase the secretion of GnRH by changing the localization and expression of GluR (metabolic or ionic type).
【作者单位】： 福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系;
【基金】：福建省自然科学基金面上项目(2014J01123)
【分类号】：R338

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