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ANKRD49通过上调Bcl-xL的表达抑制UV诱导GC-1细胞的凋亡

发布时间:2018-09-10 19:58
【摘要】:目的:利用稳定过表达Ankyrin repeat domain 49(ANKRD49)的GC-1(小鼠精原细胞)细胞模型,探讨ANKRD49过表达对GC-1细胞凋亡的影响。方法:40J/m~2紫外线(UV)刺激GC-1细胞2 min诱导凋亡,分别利用流式细胞术、Hoechst33258染色和免疫印迹技术检测过表达ANKRD49对GC-1细胞线粒体膜电位、核浓缩情况和凋亡相关蛋白多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Cleaved-Caspase-3、Bcl-xL和Bax的表达变化,以反映ANKRD49对GC-1细胞凋亡的影响。结果:流式细胞术检测结果表明稳定过表达ANKRD49的GC-1细胞线粒体膜电位下降率和细胞凋亡率均明显低于空载体组和裸细胞组(P0.05)。Hoechst33258染色结果显示ANKRD49稳定过表达组细胞的凋亡百分比明显低于其它组(P0.05)。Western blotting检测结果显示ANKRD49稳定过表达组Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase-3蛋白的表达水平明显低于对照组,而Bcl-xL蛋白表达水平明显高于对照组(P0.05)。结论:ANKRD49过表达可抑制UV诱导的GC-1细胞凋亡,其作用可能是直接或间接通过促进Bcl-xL的表达而实现的。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of ANKRD49 overexpression on the apoptosis of Ankyrin repeat domain 49 (ANKRD49) cells in GC-1 (mouse spermatogonial) cell model. Methods the apoptosis of GC-1 cell line 2 min was induced by UV (UV). The mitochondrial membrane potential of GC-1 cells was detected by flow cytometry with Hoechst33258 staining and Western blotting. In order to reflect the effect of ANKRD49 on the apoptosis of GC-1 cells, the nuclear concentration and the expression of Cleaved-Caspase-3 ADP ribose polymerase (poly ADP-ribose polymerase,PARP) were changed in order to reflect the effect of ANKRD49 on the apoptosis of GC-1 cells. Results: the results of flow cytometry showed that the decrease rate of mitochondrial membrane potential and the apoptosis rate of GC-1 cells with stable overexpression of ANKRD49 were significantly lower than those of empty vector group and bare cell group (P0.05). Hoechst33258 staining showed that the cells in ANKRD49 overexpression group were significantly lower than those in control group (P0.05). The percentage of apoptosis was significantly lower than that in other groups (P0.05). Western blotting analysis showed that the expression of Cleaved-PARP,Cleaved-Caspase-3 protein in the stable overexpression group of ANKRD49 was significantly lower than that in the control group. The expression of Bcl-xL protein was significantly higher than that of the control group (P0.05). Conclusion the overexpression of UV ANKRD49 can inhibit the apoptosis of GC-1 cells induced by UV, which may be achieved directly or indirectly by promoting the expression of Bcl-xL.
【作者单位】: 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室;山西医科大学寄生虫学教研室;
【分类号】:R329.2

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