基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株构建

发布时间：2018-10-18 14:59

【摘要】：目的:利用减毒单增李斯特菌作为疫苗载体的优势,拟构建基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株。方法:使用单增李斯特菌表达载体p ERL3过表达弧菌中共同的靶标抗原Ompk;利用PCR和RT-PCR技术分别对过表达菌株鉴定和抗原基因的检测。结果:PCR结果显示成功构建3株Ompk过表达菌株Lm-Ompk(L-O)、Lm-Lmo0576-Ompk(L-L-O)和Lm-P-Ompk(L-P-O);测序结果显示过表达菌株中外源基因的序列与NCBI结果相似性为100%;RT-PCR结果显示Ompk基因在3株过表达菌株中的转录水平均极为显著(P0.001);在抗生素条件下,Ompk基因在各过表达菌株中的表达水平显著高于在非抗性条件下的转录水平(P0.05)。结论:成功构建了3株基于载体减毒单增李斯特菌的弧菌疫苗菌株,弧菌中共同的靶标抗原Ompk在3株重组菌株中均可以稳定表达。
[Abstract]:Aim: to construct vibrio vaccine strain based on attenuated Listeria monocytogenes. Methods: Ompk;, a common target antigen of vibrio sp. ERL3, was used to identify the overexpression strain and detect the antigen gene by PCR and RT-PCR techniques respectively. Results: PCR results showed that three Ompk overexpression strains Lm-Ompk (L-O), Lm-Lmo0576-Ompk (L-O) and Lm-P-Ompk (L-P-O) were successfully constructed, and the similarity between the sequences of the overexpressed genes and NCBI was 100%. RT-PCR showed that Ompk gene was transcribed in the three overexpression strains. The expression level of Ompk gene in the over-expressed strains was significantly higher than that in the non-resistant condition (P0.05). Conclusion: three vibrio vaccine strains based on attenuated listeria monocytogenes were successfully constructed. The common target antigen Ompk of Vibrio could be expressed stably in all three recombinant strains.
【作者单位】： 上海理工大学医疗器械与食品学院;
【基金】：国家自然科学基金面上项目(31371776) 上海市研究生教育创新计划资助
【分类号】：R392

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本文编号：2279485