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铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中Fas和FAP-1蛋白表达

发布时间:2018-10-31 12:33
【摘要】:目的 研究J774细胞凋亡与PA上清液感染的关系;应用western blot法研究Fas和FAP-1蛋白在PA上清液诱导J774细胞凋亡过程中的作用。 方法 1、用15%浓度的PA上清液感染J774细胞3h,6h,9h,,在37℃培养箱中培养。 2、以Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞仪检测及Hoechest33258荧光染色等细胞形态学观察指标,研究PA上清液感染对J774细胞凋亡的诱导作用。 3、用western blot法对FAP-1和Fas蛋白定量检测。 结果 Hoechest33258荧光显微镜下观察:15%浓度的PA上清液感染J774细胞9h可见许多细胞有典型的凋亡形态学改变,并可见凋亡小体。经Hoechest33258荧光染色检查和Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞仪检测,随着PA上清液感染J774细胞时间的延长,J774细胞凋亡率均增高。各实验组J774细胞凋亡率均数与对照组比较差异均有统计学意义(P0.01);各实验组间比较差异均有统计学意义(P0.01);两种检测方法比较,相同时间感染条件下的J774细胞凋亡率均数差异无统计学意义(P0.05)。western blot结果显示,在PA上清液感染J774细胞3h后,Fas蛋白表达与对照组相比明显增强,且随着时间的延长表达逐渐增强,直到PA上清液感染J774细胞9h;而FAP-1蛋白表达随着时间的延长表达逐渐减弱。 结论 1、J774巨噬细胞凋亡与铜绿假单胞菌上清液感染有关。 2、铜绿假单胞菌上清液导致的J774细胞凋亡具有时间依赖性。 3、该实验凋亡的机制涉及Fas和FAP-1蛋白的表达。
[Abstract]:Objective to study the relationship between the apoptosis of J774 cells and the infection of PA supernatant, and to study the role of Fas and FAP-1 protein in the process of PA supernatant induced J774 cell apoptosis. Methods 1. J774 cells were infected with 15% PA supernatant for 6 h or 9 h and cultured in 37 鈩

本文编号:2302200

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