乳鼠海马神经元的分离和原代培养

发布时间：2018-11-10 19:09

【摘要】：目的建立一种简单、稳定的乳鼠海马神经元的分离及原代培养方法。方法选用出生24 h内的乳鼠,分离双侧海马区,机械吹打分散,获得细胞悬液。用含胎牛血清的DMEM/F12培养基培养24 h后,换成添加B27的Neuralbasal培养基进行原代培养,第7天采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光细胞化学染色鉴定神经元纯度。结果在体外培养条件下海马神经元细胞结构特征明显,能形成典型的神经细胞网络,100%细胞呈NSE阳性。结论依靠简单的机械分散并配合特定培养条件可获得生长状态良好、纯度高的海马神经元。
[Abstract]:Objective to establish a simple and stable method for the isolation and primary culture of hippocampal neurons in neonatal rats. Methods the bilateral hippocampal area was isolated from newborn rats within 24 hours after birth, and the suspension was obtained by mechanical blow dispersion. DMEM/F12 medium containing fetal bovine serum was cultured for 24 h, then replaced with Neuralbasal medium supplemented with B27 for primary culture. On the 7th day, neuron specific enolase (NSE) immunofluorescence cytochemical staining was used to identify the purity of neurons. Results under the condition of culture in vitro, the structural characteristics of hippocampal neurons were obvious, which could form a typical neural network, and 100% of the cells were NSE positive. Conclusion Hippocampal neurons with good growth state and high purity can be obtained by simple mechanical dispersion and combined with specific culture conditions.
【作者单位】： 西南医科大学中西结合学院;西南医科大学附属中医医院中西医结合防治器官纤维化实验室及中西医结合研究中心;西南医科大学附属中医医院脾胃科;
【基金】：四川省科技厅基础研究项目(2013TY0158)
【分类号】：Q813.11;R-33

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