新生大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞原代培养方法的改进

发布时间：2018-11-12 12:48

【摘要】：目的改进体外SD大鼠Ⅰ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial typeⅠ,ATⅠ)的原代培养方法,用更为简单的培养方法获得较高纯度的ATⅠ。方法选用新生1d的SD大鼠,消毒后待新生大鼠呼吸停止后断头取肺,采用胶原酶Ⅰ和DNaseⅠ消化分离法获取原代细胞,将细胞接种在Ⅰ型鼠尾胶原蛋白包被过的细胞板中,利用差速贴壁法纯化ATⅠ,同时细胞培养48h后进行换液,倒置显微镜下观察细胞的生长状态,用细胞水通道蛋白5(AQP5)、肺表面活性物质相关蛋白(SPC)、植物凝集素(BSI)、波形蛋白(Vimentin)4种肺细胞的特异性表达产物鉴定细胞。结果接种2d时,细胞开始贴壁生长。4~6d时细胞开始增殖,呈现梭形、立方形、多角形等多种形态。8d时细胞增殖能力达到最大,细胞活力为(87±8)%,细胞纯度为(87±5)%。结论对组织取材、分离和培养进行改进可获得产量高、生长状态好、纯度高的ATⅠ。
[Abstract]:Objective to improve the primary culture method of SD rat type 鈪，

本文编号：2327150