张力敏感性阳离子通道在气道黏液基础分泌中的介导作用

发布时间：2018-11-21 07:58

【摘要】：目的探讨节律性压力波维持气道黏蛋白(MUC)基础性分泌的主要信号节点。方法采用气/液相界面法培养人气道上皮16HBE细胞,模拟正常呼吸所产生的节律性压力波作用于培养细胞,分为静态对照组、节律性压力波组、节律性压力波+张力敏感性阳离子通道(TRPV4)拮抗剂钌红、节律性压力波+维拉帕米、节律性压力波+蛋白激酶C抑制剂(GF109203x)共5组,通过激光共聚焦观察Ca2+浓度变化,RT-PCR检测TRPV4mRNA表达,West-ern bolt检测MARCKS及SNAP-23水平,ELISA检测MUC(2、5AC和5B)分泌情况。结果节律性压力波组胞内Ca2+浓度(312.34±17.08)和TRPV4 mRNA(0.63±0.03)较静态对照组(196.16±35.06,0.28±0.05)显著增高(P0.01),RR干预后明显降低(P0.01);同时MUC(2、5AC和5B)分泌,pMARCKS及pSNAP-23蛋白水平明显增高(P0.01),给予Ca2+及PKC抑制剂预处理后,上述各指标蛋白均降低(P0.01)。结论 TRPV4参与节律性压力波维持气道上皮基础性MUC分泌平衡,此过程籍以激活Ca2+/PKC/MARCKS信号通路实现。
[Abstract]:Objective to investigate the main signal node of rhythmic pressure wave in maintaining the basic secretion of airway mucin (MUC). Methods Human airway epithelial 16HBE cells were cultured by gas / liquid interface method. The cultured cells were exposed to rhythmic pressure waves produced by normal respiration. The cells were divided into static control group and rhythmic pressure wave group. Ruthenium red, rhythmic pressure wave verapamil and rhythmic pressure wave protein kinase C inhibitor (GF109203x), antagonists of rhythmic pressure wave tension-sensitive cationic channel (TRPV4), were used to observe the concentration of Ca2 in 5 groups. TRPV4mRNA expression was detected by RT-PCR, MARCKS and SNAP-23 were detected by West-ern bolt, and MUC (22AC and 5B) secretion was detected by ELISA. Results the concentrations of intracellular Ca2 (312.34 卤17.08) and TRPV4 mRNA (0.63 卤0.03) in the rhythmic pressure wave group were significantly higher than those in the static control group (196.16 卤35.06 卤0.28 卤0.05). At the same time, MUC (2C5AC and 5B) secretion, pMARCKS and pSNAP-23 protein levels were significantly increased (P0.01). After pretreatment with Ca2 and PKC inhibitor, the above indexes were all decreased (P0.01). Conclusion TRPV4 is involved in rhythmic pressure wave to maintain the secretion balance of basic MUC in airway epithelium, which is realized by activating Ca2 / PKC/MARCKS signaling pathway.
【作者单位】： 重庆医科大学附属第二医院呼吸内科;俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理研究所;
【基金】：国家自然科学基金(31171346);国家自然科学基金中俄国际合作项目(81011120108) 中俄政府间合作项目(2009:13-01)
【分类号】：R332

【参考文献】

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【共引文献】

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本文编号：2346380