围植入期小鼠子宫内膜形态学及IGFBP-4、IGF-2表达的研究

发布时间：2018-12-09 08:03

【摘要】：目的①观察动情期非妊娠及围植入期真孕和假孕小鼠子宫内膜的光镜结构变化特点;②观察动情期非妊娠及围植入期真孕和假孕小鼠子宫内膜的超微结构特点;③观察围植入期小鼠子宫内膜IGFBP-4和IGF-2的表达分布状况;④探讨IGFBP-4和IGF-2在围植入期真孕小鼠子宫内膜表达的关系。方法以成年未经产雌性昆明种小鼠为研究对象,以动情期雌鼠分别与正常雄鼠和输精管结扎雄鼠3:1合笼,次晨查到阴栓记作真(假)孕1 d。分别在1～8 d各将120只真孕和120只假孕小鼠颈椎脱臼处死,剖腹取其子宫并取动情期非妊娠小鼠子宫作对照,4%多聚甲醛固定,分别进行HE染色观察真孕和假孕小鼠子宫内膜的光镜结构变化;电镜观察真孕及假孕3～6 d小鼠子宫内膜的超微结构改变;免疫组化SP法检测子宫内膜IGFBP-4和IGF-2的表达;显微成像系统拍摄图像并进行计算机图像分析系统分析免疫组化染色结果。另取120只假孕4 d小鼠,手术开腹提取其双角子宫,一侧注射0.1 mL植物油诱导蜕膜反应,一侧未作任何处理作为对照,于假孕8 d颈椎脱臼处死小鼠,剖腹取其处理侧子宫,4%多聚甲醛固定,分别进行HE染色观察小鼠子宫内膜光镜结构变化,免疫组化检测IGFBP-4和IGF-2蛋白的表达,显微成像系统拍摄图像分析免疫组化染色结果。结果①HE染色结果,真孕1～8 d小鼠子宫内膜呈动态变化趋势,植入前期(孕1～3 d)固有层腺体增多,腺腔开始变得不规则,出现少量分泌物,血管增生,基质细胞排列疏松、基质水肿;植入期(孕4～5 d)固有层腺体进一步增多,腺腔变得极不规则,充满分泌物,血管进一步增生、弯曲并呈螺旋状分布,基质细胞变得十分肥大,内膜进一步增厚;植入后期(孕6～8 d),除具有上述两期特点外,基质细胞完全增殖分化为蜕膜细胞,腺体减少。②透射电镜结果,真孕3～6 d小鼠子宫内膜腺上皮、腔上皮及基质细胞中分布有大量的各类细胞器,与动情非妊娠小鼠相比要丰富的多,尤其是在植入期,腺上皮、腔上皮及基质细胞中线粒体、高尔基复合体、粗(滑)面内质网、分泌颗粒等非常丰富,基质细胞肥大水肿、核大而圆,胞质内还有丰富的糖原、脂滴及溶酶体;假孕3～6 d小鼠子宫内膜的超微结构变化不甚明显,只在假孕3～4 d出现类似于真孕3～4 d内膜的超微结构改变,腺上皮、腔上皮及基质细胞中分布有大量的细胞器,较动情非妊娠小鼠丰富,假孕5～6 d内膜变化几乎与动情非妊娠小鼠无差别。③免疫组化染色结果,真孕1～8 d,IGFBP-4在真孕3 d小鼠子宫内膜开始表达,阳性产物主要分布于子宫内膜腺上皮、腔上皮和基质细胞的胞质中,于5～6 d表达最强,7～8 d表达减弱;假孕1～8 d,IGFBP-4在假孕5 d小鼠子宫内膜开始表达,主要分布于子宫内膜腺上皮和腔上皮细胞胞质中,其表达水平与动情未孕期小鼠相似,但在基质细胞不表达;真孕1～8 d,IGF-2主要表达于子宫内膜腺上皮、腔上皮和基质细胞胞质中,5～8 d表达最强;假孕1～8 d,IGF-2在假孕3 d小鼠子宫内膜开始表达,主要分布于腺上皮、腔上皮及基质细胞胞质中,其表达水平与动情未孕期小鼠类似;IGFBP-4与IGF-2在人工蜕膜化小鼠子宫内膜均有表达,主要分布于腺上皮细胞胞质中和植物油诱导后的整个蜕膜细胞胞质中。结论①真孕及假孕1～8 d小鼠子宫内膜形态学改变呈动态变化趋势,以植入期变化最为明显;②真孕3～8 d小鼠子宫内膜持续表达IGFBP-4,提示IGFBP-4可能在小鼠胚胎植入中发挥重要的生理生化作用;③真孕1～8 d小鼠子宫内膜广泛表达IGF-2,提示IGF-2可能在小鼠胚胎植入中发挥重要的作用;④假孕1～8 d小鼠子宫内膜IGFBP-4与IGF-2的表达规律,提示二者的表达不仅受自体激素的调控,也和胚胎与子宫内膜的刺激与分泌有关;⑤IGFBP-4与IGF-2分别在真孕及人工蜕膜化小鼠子宫内膜蜕膜细胞的表达,提示二者有可能共同参与小鼠胚胎植入及植入后子宫内膜的蜕膜化过程。
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【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R321

【参考文献】